《SPA-1蛋白調控乳腺癌細胞浸潤和轉移分子機制研究》是依託華中科技大學，由蘇莉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：SPA-1蛋白調控乳腺癌細胞浸潤和轉移分子機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：蘇莉
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
癌細胞轉移是癌症患者死亡的主要原因, 深入闡明其機制具有重要理論與實踐意義。小G蛋白Rap1特異性GAP（SPA-1）是乳腺癌轉移效率修飾位點Mtes1中主要候選基因之一。我們前期研究發現：乳腺癌轉移患者癌細胞SPA-1表達顯著高於非轉移患者，而SPA-1表達沉默的人乳腺癌細胞遷移能力明顯下降；SPA-1可與integrin相互作用；可促進MMP9表達；誘導VEGF表達促進腫瘤血管新生。上述實驗進展提示，SPA-1是參與癌細胞轉移的關鍵分子。本項目擬採用細胞力學、雙光子顯微成像和高分辨光聲成像等技術在細胞和整體動物水平闡述SPA-1與integrrin直接相互作用調控腫瘤細胞骨架重塑；揭示通過影響FAK磷酸化等信號通路促進蛋白酶表達與活性而促進腫瘤組織胞外基質降解以及誘導VEGF表達而促進腫瘤組織血管新生的精細分子機制，為基於SPA-1的癌症轉移早期診斷和干預策略提供實驗依據。
結題摘要
癌細胞轉移是導致癌症病人死亡的主要因素，深入闡明其機制具有重要理論與實踐意義。項目期間，我們的研究發現小G蛋白Rap1特異性GAP, SIPA-1 ,促進乳腺癌細胞浸潤和轉移。SIPA-1蛋白在乳腺癌轉移患者的癌細胞中表達顯著高於非轉移患者乳腺癌細胞。核定位SIPA-1通過作用於Integrinβ1啟動子啟動Integrin蛋白的表達，從而激活Integrin介導的FAK/AKT信號通路，增加基質金屬蛋白酶MMP9的表達，促進乳腺癌細胞粘附、遷移和浸潤。我們進一步發現SIPA1通過乳腺癌細胞外泌體調節血管內皮細胞通透性和能量代謝。Sipa1 基因沉默後的MDA-MB-231/sh-Sipa1外泌體刺激組的成管數目顯著高於MDA-MB-231外泌體體刺激組的成管數目，能顯著促進血管內皮細胞偽足形成。更進一步，採用Redox Ratio技術，利用共聚焦顯微鏡檢測HUVCE細胞內FAD和NADH自發螢光強度，計算FAD/(FAD+NADH) Redox比值。結果表明MDA-MB-231及MDA-MB-231/sh-Sipa1細胞外泌體刺激，增加HUVCE細胞FAD/(FAD+NADH) 比值，提高HUVCE細胞能量代謝水平。Sipa1基因下調後的乳腺癌外泌體刺激後，能量代謝進一步增強。本項目不僅將揭示細胞內SIPA-1蛋白調控癌細胞發生浸潤和遷移的時空規律，而且通過研究乳腺癌外泌體對腫瘤微環境的影響，特別是對HUVEC細胞的通透性和能量代謝情況做出初步研究，為SIPA-1成為癌症轉移早期診斷新標記物和治療新靶點、新方案提供新的理論依據和技術支撐。
