《MDR1與Anxa2相互作用調節耐藥乳腺癌細胞侵襲的分子機制研究》是依託天津醫科大學，由牛瑞芳擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MDR1與Anxa2相互作用調節耐藥乳腺癌細胞侵襲的分子機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：牛瑞芳
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
腫瘤的化學治療是最重要的治療手段之一，而多藥耐藥誘發的腫瘤細胞侵襲能力的增強是臨床面臨的難題之一。我們的前期研究發現，在乳腺癌耐藥細胞中，Anxa2 的表達隨著MDR1的升高而同步升高，免疫螢光檢測也證實二者存在非常好的共定位，推測MDR1與Anxa2相互作用促進耐藥乳腺癌細胞的遷移。本課題擬採用免疫共沉澱、免疫螢光、Western Blot、siRNA等多種實驗技術，研究MDR1的表達和活性對Anxa2的表達和酪氨酸磷酸化的影響，明確P-gp與Anxa2相互作用的作用方式，進一步證實二者協同作用促進耐藥腫瘤細胞的遷移；同時從相關的Rho/ROCK/cofilin、ERK1/2, p38 MAPK和Nanog-STAT3信號通路入手，探討多藥耐藥誘導Anxa2過度表達的機制，闡明這種協同作用促進耐藥腫瘤細胞侵襲力增強的分子機制；研究結果將對臨床耐藥腫瘤的治療提供一條新思路。
結題摘要
化療是腫瘤最重要的治療手段之一，而多藥耐藥誘發的癌細胞侵襲能力增強是臨床面臨的難題之一。Anxa2又名Annexin a2、annexin II或p36等，大量研究發現Anxa2在多種腫瘤組織中高表達，而且與患者預後不良明顯相關，但是分子機制不明。前期研究發現乳腺癌細胞中Anxa2與多藥耐藥蛋白MDR1的表達具有明顯的相關性，而且二者在細胞中存在非常好的共定位，提示MDR1可能通過與Anxa2相互作用促進耐藥乳腺癌細胞的侵襲。本次研究中我們採用Real time PCR的方法發現：與正常乳腺組織相比，Anxa2和MDR1在浸潤性導管癌中的表達明顯增高，而且其高表達與患者發生淋巴結轉移密切相關；此外，二者在100例乳腺浸潤性導管癌中的表達呈正相關，提示二者的一致性升高可能與乳腺癌的進展有關。隨後我們發現上調藥物敏感的MCF-7細胞中Anxa2的表達水平可以明顯促進細胞的增殖和侵襲能力，而且證實這種作用可能與Erk1/2的激活和Cyclin D1的表達上調有關。免疫螢光染色發現Anxa2和MDR1的編碼蛋白P-glycoprotein（P-gp）在細胞膜存在共定位，反向免疫沉澱實驗進一步證實二者存在相互作用。採用RNAi技術降低MDR1的表達或者採用P-gp的抑制劑抑制其活性可以明顯抑制多藥耐藥細胞的遷移和侵襲能力，同時還可以抑制阿黴素誘導的Anxa2的磷酸化和Erk1/2的磷酸化，證實Anxa2是介導耐藥乳腺癌細胞侵襲的關鍵分子。此外，我們還發現下調MCF-7細胞中Nanog的表達可以明顯抑制細胞的增殖能力，而且這種作用與抑制Cyclin D1的表達有關。最後我們進一步採用免疫共沉澱結合質譜的方法發現P-gp與酪氨酸激酶Src以及Rack1存在相互作用，目前關於Src/Rack1與P-gp以及Anxa2的相互作用模式以及在癌細胞侵襲轉移中的作用正在深入研究中。綜上所述，經過三年多的研究，我們證實了Anxa2和P-gp是腫瘤患者預後不良的重要分子，P-gp通過與Anxa2的相互作用，介導了Anxa2的磷酸化和Erk1/2激活從而促進了多藥耐藥乳腺癌細胞的遷移和侵襲，我們的研究結果對臨床耐藥腫瘤的治療提供了一條新思路。
