《乳腺癌中AP-1信號通路新型調節因子的功能研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由葉棋濃擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：乳腺癌中AP-1信號通路新型調節因子的功能研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：葉棋濃
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
AP-1（activator protein 1）是一類核轉錄因子，通過蛋白質間相互作用在乳腺癌等多種腫瘤的發生髮展中發揮極其重要的作用。儘管已發現一些與AP-1相互作用的蛋白質，但只能部分解釋乳腺癌等腫瘤發生髮展機制，且許多與AP-1相互作用的蛋白質的臨床意義不清楚。為闡明與AP-1相關的乳腺癌的發生機制，我們利用GST pull-down 、免疫共沉澱和報告基因技術發現新型的與AP-1的重要成員c-Fos相互作用的蛋白質RBPMS。在此基礎上，我們擬進一步定位RBPMS與c-Fos間相互作用的區域/結構域；利用報告基因、RT-PCR、Western blot、EMSA、染色質免疫沉澱、RNA干擾等技術確定它們間相互作用的下游靶標及其分子機制；檢測RBPMS對乳腺癌細胞生長、侵襲和轉移的影響；確定RBPMS在乳腺癌中的臨床意義，為闡明乳腺癌發病機理及發現新的乳腺癌診斷和治療靶標打下基礎。
結題摘要
激活蛋白（AP-1）是一類即刻早期應答基因編碼的核轉錄因子。在哺乳動物細胞中，AP-1主要由Jun和Fos異源二聚體組成，在腫瘤的發生髮展中具有重要作用。與AP-1家族相互作用是調節AP-1活性的重要方式之一。RNA結合蛋白（RBP）屬於RNA結合蛋白家族，但RBP在腫瘤發生髮展中的作用還不清楚。本研究首先確定乳腺癌中RBP三種剪下體的內源表達情況，發現RBP1和RBP2是常見的剪下體形式。隨後我們探討了RBP1和RBP2對AP-1轉錄活性及其下游基因表達的影響，確定其在腫瘤細胞生長調節中的作用。轉錄活性實驗表明，RBP1和RBP2均可以抑制AP-1活性，且通過c-Fos/c-Jun依賴方式調節AP-1活性。RBP1和RBP2可以使腫瘤細胞中與侵襲與轉移相關的AP-1靶基因表達水平下降。免疫共沉澱、GST pull-down、雷射共聚焦等實驗均證明RBP1與c-Fos存在著特異的相互作用，不與Fos和Jun家族的其它成員相互作用。RBP2不與Fos和Jun家族的主要成員有相互作用。與c-Fos發生相互作用需要RBP1的RRM結構域和C端區域，c-Fos的bZIP區域與RBP1相互作用。RBP1和c-Jun可以競爭性與c-Fos結合。RBP1表達阻礙c-Fos/c-Jun異源二聚體的形成，因此我們認為，RBP1通過與c-Fos相互作用影響c-Fos/c-Jun二聚體的形成，從而抑制c-Fos介導的AP-1轉錄活性及其下游靶基因的表達。體外培養乳腺癌細胞系中，RBP1和RBP2均能夠抑制細胞生長和遷移；體內裸鼠成瘤實驗獲得與體外一致的結果，RBP敲低造成腫瘤侵襲轉移相關基因表達水平增加，腫瘤組織血管生成明顯增加。在臨床標本中，與癌旁相對正常的乳腺組織相比，RBP在乳腺癌組織中表達水平顯著下降。綜上所述，RBP可能在乳腺癌的發生髮展中作為抑癌基因發揮重要作用。
