《CDK2AP1在乳腺癌中抑制癌變發生的分子信號通路和臨床意義》是依託中南大學，由周衛兵擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：CDK2AP1在乳腺癌中抑制癌變發生的分子信號通路和臨床意義
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：周衛兵
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
乳腺癌是嚴重威脅女性健康的最常見惡性腫瘤。申請者在前期工作中通過組織形態學和體外、體內實驗等研究，證實CDK2AP1在抑制乳腺癌惡性增殖中發揮重要作用，其功能是通過調控細胞周期實現的，CDK2AP1的功能缺失正是導致乳腺癌惡變的關鍵因素之一。在前期研究基礎上，申請者發現在乳腺癌中CDK2AP1直接調控CDK2，並存在不同亞細胞定位。本項目擬通過Pathway array結合ChiP-qPCR等研究方法，闡明CDK2AP1在乳腺癌中抑制癌變發生的分子信號通路，研究不同亞細胞定位與相關信號分子功能的聯繫，並通過臨床樣本分析CDK2AP1的表達、定位與病理特徵和臨床預後的相關性，為開發其作為臨床分子診斷標記物和可能的生物治療套用奠定理論基礎。
結題摘要
細胞周期蛋白依賴性激酶2關聯蛋白1（cyclin-dependent kinase 2-associated protein 1，CDK2AP1）是一個重要的生長抑制因子，在人類正常組織中普遍表達。本研究的重點是其在乳腺癌中的作用及其機制。利用酵母雙雜交篩選CDK2AP1的相互作用蛋白，並用pull down驗證發現，與腫瘤侵襲轉移密切相關的組織蛋白酶L亞型（Cathepsin L1，CTSL）可能是與CDK2AP1相互作用的分子。套用免疫組化檢測臨床標本，發現CDK2AP1高表達與轉移和HER2高表達相關。CDK2AP1核定位表達與年齡和PR表達水平相關，但與轉移關係並不密切。通過蛋白晶片比較CDK2AP1敲減組和過表達組信號通路蛋白的表達變化，發現CDK2AP1表達改變和STAT3通路的激活相關；過表達CDK2AP1的細胞中p-STAT3增加。對乳腺癌患者有轉移且CDK2AP1陽性表達，和無轉移且CDK2AP1陰性表達的活檢新鮮臨床病理樣本進行lncRNA晶片篩選，發現lncRNA-ATB（又稱為lncRNA-AL589182.3）、lncRNA-DC、DANCR等顯著升高。與相應的空載體組細胞相比，經慢病毒載體過表達或敲減CDK2AP1基因的MCF-7細胞和MDA-MB-231細胞，發現lncRNA-ATB的表達與CDK2AP1的表達水平相關，而lncRNA-DC、DANCR的表達與CDK2AP1的變化不相關。並在組織水平上發現lncRNA-ATB及炎性因子（Il-6、TGFβ）在CDK2AP1陽性表達的乳腺癌病理樣本中的mRNA水平顯著升高。過表達乳腺癌細胞MDA-MB-231細胞的lncRNA-ATB後的顯著引起p-STAT3水平增加，並檢測到炎性因子(IL-6、TGF-β、TNF-α)的mRNA水平顯著增高。通過細胞功能學實驗證明敲減lncRNA-ATB對乳腺癌細胞侵襲的能力影響不大。說明lncRNA-ATB影響乳腺癌的轉移不是通過該基因的直接作用，而是通過調節炎性因子的表達及分泌間接實現的。擬在此基礎上，深入研究lncRNA-ATB調節乳腺癌細胞炎症因子產生的信號通路，從而促進乳腺癌細胞轉移的機制。
