《MiR-16對肝癌巨噬細胞表型和功能的影響及分子機制》是依託揚州大學，由賈筱琴擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MiR-16對肝癌巨噬細胞表型和功能的影響及分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：賈筱琴
- 依託單位：揚州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腫瘤微環境的免疫抑制狀態是腫瘤免疫逃逸的主要原因，而腫瘤相關巨噬細胞在其微環境的免疫調節中發揮重要作用。我們前期研究發現：MiR-16在抗腫瘤中發揮重要作用；在體外誘導的M2型巨噬細胞中，miR-16表達下調。本課題以miR-16分子為切入點，採用流式細胞術、雷射共聚焦顯微技術、Real-time PCR、慢病毒轉染、轉基因動物模型等方法，從體內、體外研究miR-16 調控腫瘤微環境中巨噬細胞的分化及在腫瘤免疫逃逸中的作用；闡明miR-16調控巨噬細胞激活的靶基因和分子機制；探討影響巨噬細胞miR-16表達差異的主要因素。本研究有助於明確miR-16在腫瘤相關巨噬細胞分化過程中的地位及其參與肝癌免疫逃逸機制，為肝癌的免疫治療提供有意義的潛在靶點。
結題摘要
腫瘤相關巨噬細胞在誘導免疫抑制性微環境中發揮重要作用。我們前期研究發現，MiR-16具有抗腫瘤活性，且M2型巨噬細胞內miR-16的表達下調。因此miR-16對巨噬細胞極化（M1/M2）的影響，及其在肝癌免疫逃逸中的作用和機制期待深入研究。 首先發現miR-16調節巨噬細胞的極化過程。巨噬細胞體外經IL-4誘導培養為M2，將慢病毒（含miR-16基因序列）感染M2巨噬細胞，CD16/32表達上調，CD206、Dectin-1表達下調；且NO、 IL-12分泌增加，IL-10產生降低。提示miR-16體外促進M2型巨噬細胞向M1型巨噬細胞轉化。我們進一步證實miR-16下調M2型巨噬細胞的功能，進而影響T細胞活性，其機制可能與調節巨噬細胞PD-L1的表達有關。 利用miR-15a/16-1-/-小鼠模型，發現生理狀態下幼齡（8-10周）miR-15a/16-1-/-小鼠脾臟巨噬細胞及其它免疫細胞無明顯變化，但老齡（8-10月）小鼠脾臟CD19+Tim-1+細胞的頻率顯著增高，且IL-10分泌增多。給miR-15a/16-1-/-小鼠（8~10周）皮下移植肝癌細胞荷瘤，發現與對照小鼠相比，miR-15a/16-1-/-小鼠體內移植瘤生長速度明顯減慢，腫瘤組織內M1/M2型巨噬細胞的比值增高，且CD8+ NKG2D+細胞的頻率升高。 研究結果豐富了對miR-15a/16-1生物學作用的認識，證實miR-15a/16-1具有免疫調節活性，並為基於miR-15a/16-1開發臨床干預措施提供重要的實驗依據。
