《GPM6A在非酒精性脂肪性肝炎相關肝癌中的作用及機制探討》是依託復旦大學，由吳健擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：GPM6A在非酒精性脂肪性肝炎相關肝癌中的作用及機制探討
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：吳健
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
非酒精性脂肪性肝病作為肝癌前病變已被人們所接受，但對非酒精性脂肪性肝炎（NASH）未出現肝硬化而直接進展為肝癌的分子機制不明。本課題組對肝癌與癌旁肝組織進行基因表達譜研究，發現肝癌組織中GPM6A表達比癌旁組織（伴脂肪性肝炎）明顯降低，與癌基因c-myc、多能幹性基因（KLF4、NANOG）及形態發生基因GLI-1的表達趨勢相反。GPM6A為跨膜糖蛋白，僅有的研究顯示該基因可能為B淋巴細胞性白血病的致癌基因。本立項旨在闡明GPM6A在NASH相關肝癌發生、進展及轉移中的作用。本項目將在誘導GPM6A敲除小鼠形成NASH基礎上繼續誘導原發性肝細胞癌，並以野生型小鼠作對照，研究GPM6A在肝癌發生髮展中的作用。同時利用低和高表達GPM6A的肝癌細胞株，研究其對肝癌細胞成瘤性、轉移及耐藥的影響，並進一步探討該基因與c-myc、KLF-4、NANOG、GLI-1等的關係，明確該基因的信號調控機制。
結題摘要
背景： GPMA是存在於內皮細胞的糖蛋白，對其生理功能及病理狀態下的作用缺乏認識。通過基因晶片篩選發現NASH-HCC 病理標本中GPM6A水平顯著低於癌旁組織。因此，本研究著重探討GPM6A在NASH-HCC發生中的作用及其低表達的分子機制。主要結果：14對NASH-HCC和21對其它基礎病因HCC確認肝癌組織中GPM6A表達遠低於癌旁組織，下降幅度達5倍左右。約一半肝癌細胞株GPM6A 表達下降達50-100倍。TCGA資料庫中50例HCC GPM6A mRNA水平低於癌旁組織。GPM6A的低表達水平與肝癌患者的總生存及無進展生存期呈負向關。在肝癌SMMC-7721、MHCC-97H細胞株過表達GPM6A後細胞增生率下降約30%，克隆形成率下降達40%。高表達GPM6A還顯著降低劃痕修復率及遷移率。為探討GPM6A低表達的分子機制，364例TCGA測序結果中僅發現1例有錯義突變及2例有順義點特變，推測基因突變不是引起GPM6A低表達的主要原因。GPM6A啟動子區無CpG 島，但有高甲基化位點。在5對GPM6A顯著低表達的肝癌樣本中，3個CpG位點的甲基化水平均顯著高於對應的癌旁組織。但抑制甲基化水平不能糾正GPM6A的低表達水平。因此，GPM6A啟動子區甲基化也可能不是GPM6A低表達的主要原因。通過生物信息學發現可結合到GPM6A非翻譯區的 miRNA-96-5p的表達方式與GPM6A呈相反規律，過表達miR-96-5p也降低GPM6A的表達，同時促進肝癌細胞的增生、侵襲和轉移。結論：現有結果表明GPM6A基因在肝癌組織中低表達受miR-96-5p調控。miR-96顯著促進腫瘤的發生和進展，過表達GPM6A則可以抑制miR-96的促癌功能，說明miR-96可能通過抑制GPM6A的表達發揮其促癌作用。而GPM6A本身為抑癌基因，它的降低不僅有利於肝癌的起始與進展，還預示不良預後。
