《miR-200a在DEHP暴露致骨骼肌胰島素抵抗過程中的調控機制研究》是依託廈門大學，由魏傑擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-200a在DEHP暴露致骨骼肌胰島素抵抗過程中的調控機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：魏傑
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
DEHP暴露是胰島素抵抗的風險因素之一，但作用機制研究報導較少。miRNA作為內源性小分子RNA，可通過調控胰島素信號通路參與胰島素抵抗的發生。骨骼肌是胰島素抵抗發生的主要部位。前期研究發現，DEHP暴露導致小鼠骨骼肌中miR-200a表達及胰島素刺激下Akt磷酸化水平顯著變化。所以，本項目擬以C57BL/6小鼠和C2C12細胞株為研究對象，系統分析DEHP暴露致骨骼肌胰島素抵抗發生的時程和量效規律；研究DEHP暴露對骨骼肌PI3K/Akt胰島素信號通路的影響；探討DEHP暴露誘導骨骼肌miR-200a表達變化的規律和特點；篩查DEHP暴露誘導骨骼肌PI3K/Akt信號通路轉導阻滯過程中受miR-200a調控的靶基因並構建miR-200a-mRNA相互作用的分子調控網路；最終揭示DEHP暴露誘導骨骼肌胰島素抵發生的分子機制。本項目有望找到DEHP暴露致胰島素抵抗發生的潛在生物標誌物。
結題摘要
近年來的研究顯示，環境內分泌干擾物暴露也是導致人群糖尿病發生的一個不可忽視的危險因素。本項目選取了兩種典型的內分泌干擾物鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)和雙酚A (BPA)作為研究對象，展開其致機體胰島素抵抗、胰島β細胞分泌功能異常及非酒精性脂肪肝發生中分子機制。本項目現已取得較為理想的研究成果：(1) 研究DEHP暴露對小鼠葡萄糖耐量、胰島素耐量以及骨骼肌中Akt依賴的胰島素信號通路和氧化應激通路關鍵基因和蛋白表達的影響。結果表明：DEHP暴露顯著降低小鼠的葡萄糖耐量和胰島素耐量，引起胰島素抵抗的發生。鑒於骨骼肌在胰島素抵抗中的關鍵作用，發現DEHP暴露抑制小鼠骨骼肌中Insr和Irs1的表達水平，干擾Akt依賴的胰島素信號通路與骨骼肌中Keap1-Nrf2抗氧化信號通路障礙相關。抗氧化劑NAC處理，通過改善Keap1-Nrf2抗氧化信號通路，可恢復Insr和Irs1的表達水平，從而保護了DEHP誘導的胰島素抵抗的發生。細胞水平研究發現，誘導分化後的C2C12細胞經DEHP暴露引起的胰島素抵抗是與DEHP下調miR-17介導氧化應激，引起miR-200a表達上調，從而靶向抑制Insr和Irs1有關。(2) 探究miRNA在BPA暴露對小鼠胰島細胞分泌功能紊亂中的作用。結果表明：miR-338可以作為胰島素分泌的重要調節因子，miR-338通過與胰腺關鍵轉錄因子Pdx1相互作用，能夠直接調節胰島素分泌功能。短期BPA暴露導致原代培養的小鼠胰島細胞中Pdx1表達升高，而長期BPA暴露導致原代培養的小鼠胰島細胞中Pdx1表達顯著受抑。短期BPA暴露可通過Gpr30下調miR-338的表達，促進胰島素分泌；長期BPA暴露則通過Glp1r上調miR-338的表達，通過引起胰島細胞凋亡發生，導致胰島素分泌能力下降。(3) 探究BPA暴露如何調控SREBF1導致非酒精性脂肪肝發生。結果表明：BPA暴露通過干擾miRNA的生成機制抑制miR-192表達下降，miR-192可結合到SREBF1的3’UTR，通過促進SREBF1的表達引起肝臟脂質蓄積，導致非酒精性脂肪肝發生。項目已正式發表2篇SCI研究論文，1篇正在投稿中；培養碩士研究生2名。項目完成預定研究計畫，達到預期的研究目標。
