《GAPDH在乳腺癌細胞EMT及乳腺癌轉移中的表達與功能研究》是依託上海交通大學，由趙倩擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：GAPDH在乳腺癌細胞EMT及乳腺癌轉移中的表達與功能研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：趙倩
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腫瘤轉移是惡性腫瘤導致患者死亡的首要因素。上皮-間質轉化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)是指上皮細胞通過特定程式多戒殃轉化為間質細胞的過程，是惡性腫瘤細胞獲得轉移能力的重要步驟。腫瘤細胞的代謝在整體上發生改變，其顯著特徵是腫瘤細胞在有氧狀態下也優先進行糖酵解，而不是通過氧化磷酸化提供能量，即Warburg效應。我們在前期研究中發現Snail和TGF-B誘導細胞發生EMT時，參與糖酵解的3-磷酸甘油醛脫氫酶（GAPDH）蛋白水平顯著升高， RNA干擾實驗初步證明其參與乳腺癌細胞的轉移，在此基礎上，我們擬對GAPDH蛋乃灶戰辣白在EMT中上調的分子機制及其參與乳腺癌轉移的途徑和機制進行深入研究，結合臨床乳腺癌病人GAPDH水平與腫瘤轉移相關性的研究，旨在揭示EMT和腫瘤轉移過程中葡萄糖代謝改變的原因和結果，為明確腫瘤EMT和轉移發生的分子機理提供新的理論依據。
結題摘要
腫瘤轉移是惡性腫瘤導致患者死亡的首要因素。上皮-間質轉化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)是指上皮細胞通過特定程式轉化為間質細胞的過程，是惡性腫瘤細胞獲得轉移能力的重要步驟。我們在前期研究中發現Snail和TGF-B誘導細胞發生EMT時，參與糖酵解的3-磷酸甘油醛脫氫酶（GAPDH）蛋白水平顯著升高， RNA干擾實驗初步證明其參與乳腺癌細胞的轉移，在此基礎上，我們對GAPDH蛋白在EMT中上調的分子機制及其參與乳腺癌轉移的途徑和機制進行深入研究，我們深入研究其機制時發現，在Snail和TGF-誘導細胞發生EMT過程中溶酶體的自噬功能有所改變，尤其是分子伴侶介導的自噬 (chaperone mediated autophagy, CMA)顯著下降，從說凝甩而導致了CMA降解底物蛋白的累積，而GAPDH蛋白是經典的CMA降解底物，其在上皮間質轉化過程中蛋白水平的升高正是CMA下降的結果。除了GAPDH以往，我們還發現了新的CMA降解底物- NF-κB轉錄因子p65。我們首次證明了p65是一個新的分子伴侶淋肯介導自噬底物蛋白，在上皮間質轉化過程中p65通過CMA降解過程受到明顯抑制，從而導致p65蛋白質累積和NF-κB活性升高。除了p65蛋白質累積，我們還發現CMA活性在間質樣細胞中降低，同時伴隨多種CMA底物蛋白的累積。進一步，我們通過功能模擬以簽頌提及功能回復實驗證明CMA通過選擇性調控p65蛋白質降解參淚講跨促與調節細胞EMT過程的發生以及間質樣細胞表型和功能的維持。除了分子伴侶臭櫃慨介導自噬活性降低，我們還在基因表達譜分析的基礎上，並通過一系列實驗證明在多種細胞發生EMT過程中溶酶體數目減少、溶酶體相關基因轉錄受抑制。我們發現調控溶酶體相關基因合成的關鍵轉錄因子TFEB在EMT過程中表達顯著降低，並初步證明TFEB表達與Snail呈現負相關，這為EMT過程中溶酶體數目和生物合成減少提供了可能機制。
