《CD44與RAS通路對乳腺癌細胞EMT過程的協同調控研究》是依託天津醫科大學，由曹文楓擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：CD44與RAS通路對乳腺癌細胞EMT過程的協同調控研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：曹文楓
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
上皮-間質轉化(EMT)是惡性腫瘤侵襲轉移過程中的關鍵事件，RAS通路可誘導乳腺癌細胞EMT過程發生。我們前期工作證實：RAS通路可不經過受體酪氨酸激酶（RTK）通路直接誘導EMT的發生，且與HA刺激具有協同作用，期間伴有CD44表達升高，粘著斑激酶（FAK）磷酸化。結合文獻報導和前期工作，申請者提出：在RAS通路誘導EMT過程中伴CD44表達上調，CD44與HA結合後又進一步促進RAS對EMT的誘導，這一過程可能經RAS依賴和FAK依賴兩種途徑完成，這樣就形成一個CD44的正反饋循環，啟動並維持EMT過程。本課題擬從RAS、CD44、FAK三個關鍵點入手，通過對關鍵蛋白活化/抑制的方法，檢測下游信號通路的激活/阻斷狀態，進而證實該反饋循環的存在，並在乳腺癌組織標本中進行驗證，初步闡明CD44在RAS誘導的EMT過程中的作用，對現有腫瘤轉移機製做出補充和完善，並為抗腫瘤治療提供新的思路。
結題摘要
本研究在課題組前期工作的基礎上，結合腫瘤轉移機制的研究熱點以及臨床治療中存在的問題，研究TGF-β1和EGF通路對上皮間質轉化以及腫瘤轉移潛能這兩個細胞生物學特性的作用，探討通路的共同交叉分子CD44的作用機制，探討ESRP-1對其它下游靶基因的調控作用機制以及產生的不同受體亞型分子的生物學作用，為靶向阻斷抗腫瘤治療提供新的思路。研究結果表明： 1. TGF-β1和EGF在腫瘤細胞的EMT過程中存在協同作用，在兩者的共同作用下，腫瘤細胞上皮標誌蛋白的表達量明顯下降，而間質標誌蛋白表達量顯著增加，相應信號通路的下游靶點分子也明顯激活。2. 相比較TGF-β1或EGF單獨作用，二者同時作用，使細胞獲得的間質特徵更加明顯，細胞的移動性增強，細胞的侵襲能力更顯著，在聯合使用二者的小分子抑制劑時，可以明顯降低細胞的移動和侵襲能力。3. 在TGF-β1調節EMT過程中，發現透明質酸的受體CD44與EGF的受體EGFR存在共定位，並且HA-CD44通路在TGF-β1與EGF協同誘導EMT過程中發揮著關鍵性的作用。4. EMT的過程中，相關標誌蛋白和轉錄因子均發生表達變化，尤其是ZEB1的表達上調，期間伴隨上皮選擇性剪下調節蛋白1（ESRP-1）的表達下調，且二者在變化時間上具有一致性。5. 轉染了ZEB1-siRNA後，ZEB1蛋白的表達明顯抑制，同時抑制了ESRP-1的表達下調；轉染了ZEB1表達質粒後，ZEB1的表達量明顯增多，從而導致ESRP-1的表達下降更加明顯。6. EMT過程中，ESRP-1可以選擇性剪下不同靶分子並產生不同的分子受體亞型，同時可以誘導不同的配體產生。7. 螢光素酶和CHIP實驗表明：ZEB1可抑制ESRP-1的轉錄活性。 研究得到的結論： 1. TGF-β1和EGF在腫瘤細胞的EMT過程中存在協同作用；2. TGF-β1和EGF在腫瘤細胞的EMT過程中的協同機制與HA-CD44通路密切相關；3. EMT過程中，ZEB1可以轉錄調節抑制ESRP-1的表達，從而促進EMT過程；4. ESRP-1發揮選擇性剪下作用來影響其靶基因，產生不同的受體亞型分子，對腫瘤的轉移發揮重要作用。 研究成果： 在SCI收錄期刊發表2篇論文，在中華系列及核心期刊發表6篇論文；培養研究生2名。
