《ULK1在乳腺癌轉移過程中的作用及調控機制》是依託廈門大學，由占艷艷擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：ULK1在乳腺癌轉移過程中的作用及調控機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：占艷艷
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
遠處轉移是乳腺癌患者死亡的主要原因。近期研究發現蛋白激酶ULK1的表達與乳腺癌淋巴結轉移狀態呈負相關，但其具體作用及調控機制不清楚。本項目預實驗發現高轉移人乳腺癌細胞中過表達ULK1顯著抑制其遷移和侵襲能力。ULK1能結合併磷酸化胞泌複合體亞基Exo70且敲低Exo70極大削弱ULK1對乳腺癌細胞遷移和侵襲的抑制作用。我們擬：（1）進一步通過裸鼠原位移植轉移模型驗證ULK1對乳腺癌轉移的調控作用；（2）鑑定Exo70上的ULK1磷酸化位點，並利用這些位點的點突變以及特異性識別這些位點的磷酸化抗體，從分子、細胞、動物和臨床多個水平深入探討ULK1調控乳腺癌轉移的分子機制，即通過磷酸化Exo70抑制乳腺癌細胞的遷移和侵襲；（3）探討高轉移乳腺癌中ULK1表達降低的調控機制。希望通過本項目，為乳腺癌提供預後判斷指標和治療新靶點。
結題摘要
遠處轉移是乳腺癌患者死亡的主要原因。近期研究發現蛋白激酶ULK1表達與乳腺癌淋巴結轉移狀態呈負相關，但具體作用及調控機制不清楚。我們在前期研究中發現，高轉移人乳腺癌細胞中過表達ULK1顯著抑制其遷移和侵襲能力，ULK1能結合併磷酸化胞泌複合體亞基Exo70且敲低Exo70極大削弱ULK1對乳腺癌細胞遷移和侵襲的抑制作用。這些結果提示，Exo70可能是ULK1的底物，並且可能介導了ULK1對乳腺癌轉移的抑制作用。因此，我們擬通過本項目研究，明確ULK1對Exo70的直接磷酸化作用以及磷酸化的精確位點，並闡明ULK1磷酸化Exo70在乳腺癌侵襲和遷移過程中的作用及分子機制，以期對乳腺癌轉移的分子網路有更進一步的了解，同時也為乳腺癌提供新的治療靶點。本項目研究中，我們在細胞水平、小鼠模型、臨床樣本多個層面，通過敲低、過表達、點突變等多種策略，闡明ULK1對乳腺癌轉移的抑制作用及相關分子機制。首先，我們發現，ULK1通過結合併磷酸化胞泌蛋白複合體關鍵亞基Exo70來抑制乳腺癌轉移。ULK1對Exo70上Ser47，Ser59和Ser89位點的磷酸化，嚴重地削弱了Exo70的自身寡聚化和與其它胞外分泌複合體亞基的結合，進而減少了細胞運動偽足形成以及基質金屬蛋白酶的分泌，從而抑制乳腺癌細胞的遷移和侵襲。此外我們還發現，在生長因子刺激下ERK1/2誘導Exo70 S250位點磷酸化，會抑制ULK1對Exo70的磷酸化。因此，本項目首次揭示了胞外分泌複合體重要成員Exo70在乳腺癌中受到ULK1和ERK1/2的雙重磷酸化調控，從而使得乳腺癌細胞可以根據外環境來決定潛伏還是發動侵襲轉移，為乳腺癌的治療提供了新的理論基礎。
