Dab1在乳腺癌發生髮展中的作用及分子機制研究

《Dab1在乳腺癌發生髮展中的作用及分子機制研究》是依託吉林大學，由曹讓娟擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：Dab1在乳腺癌發生髮展中的作用及分子機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：曹讓娟
• 依託單位：吉林大學

項目摘要

普通型脆性位點基因位於基因組不穩定區域，該區域修飾活躍，常與腫瘤的發生髮展密切相關。Disabled-1（Dab1）是近期發現的普通型脆性位點基因，其功能的研究主要集中在大腦皮層發育過程中神經元的遷移和定位上。有研究表明Dab1在大腦和子宮內膜癌中呈失活狀態，然而，其失活的生物學意義並不明確。本研究擬通過收集臨床乳腺癌及其癌旁標本，檢測Dab1在乳腺癌中的表達變化，研究Dab1的表達與乳腺癌臨床分期、分型、轉移潛能之間的相關性；序列分析表明Dab1基因存在5’CpG島，因此我們將探究Dab1在乳腺癌中的表達下調與甲基化修飾的關係；預實驗結果顯示，乳腺癌組織中Dab1的表達變化與淋巴結轉移狀態有顯著相關性，本項目將進一步利用體外培養的腫瘤細胞、荷瘤鼠模型和惡性腫瘤轉移模型，闡明Dab1在乳腺癌惡性進程中的作用及相關分子機制，為臨床乳腺癌的治療提供分子靶點和理論依據。

結題摘要

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤，篩選乳腺癌風險基因對於臨床診治、預後判斷具有重要的理論指導意義。Dab1（Disabled-1, Dab1）是位於1號染色體的普通脆性位點基因，其功能研究主要集中於神經系統發育。雖然已有針對Dab1在腫瘤組織中表達趨勢的初步檢測，但關於Dab1在乳腺癌發生髮展中的作用及其相關分子機制並不清楚。 本項目首先開展了Dab1在乳腺癌中的表達及其與臨床預後相關性研究；探究了Dab1在乳腺癌中表達下調與甲基化修飾的相關性；並研究了Dab1表達的下調在乳腺癌惡性進程中的作用；最後探索了Dab1依賴DCC抑制腫瘤細胞的存活及侵襲的分子機制。 通過收集乳腺癌臨床組織標本，分別從蛋白及mRNA水平檢測了Dab1的表達，發現Dab1在乳腺癌中的表達呈下調趨勢，且表達下調的Dab1與腫瘤低分化、淋巴結轉移、三陰性乳腺癌等臨床不良預後相關。ROC曲線進一步提示，Dab1低表達可以作為乳腺癌患者具有淋巴結轉移風險的預判指標。通過質譜法甲基化檢測及重亞硫酸鹽PCR方法，對乳腺癌細胞系及乳腺癌臨床標本的啟動子甲基化分析發現，Dab1表達下調與其啟動子部分甲基化修飾有一定的相關性。細胞增殖、細胞凋亡及裸鼠體內實驗表明，Dab1表達下調後，腫瘤細胞的凋亡抑制被解除，細胞存活能力增加，且易於發生侵襲性轉移。進一步機制研究表明，Dab1通過其下游DCC發揮調節細胞凋亡及細胞侵襲的功能，降低DCC表達後阻斷了Dab1的上述功能。 結合已有文獻報導及上述研究結果，課題組初步揭示了正常乳腺上皮細胞中豐富表達的Dab1通過抑制Siah泛素化，解除DCC泛素化修飾，DCC在細胞中積累，誘導細胞凋亡、抑制細胞侵襲的功能及分子機制。本項目研究結果對於闡明乳腺癌發生髮展的相關機制、尋找高效特異的治療靶點具有重要的理論意義。