《癌/睪丸抗原MAEL在乳腺癌發生髮展中的作用及分子機制》是依託湖南師範大學，由周建林擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：癌/睪丸抗原MAEL在乳腺癌發生髮展中的作用及分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：周建林
- 依託單位：湖南師範大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
癌/睪丸抗原是一種很有前景的腫瘤免疫治療的靶抗原和腫瘤標誌物。申請人發現睪丸特異表達基因MAEL在乳腺癌等多種癌組織中高表達，首次報導MAEL是一個癌/睪丸抗原，並發現在乳腺細胞系HBL100中過表達MAEL基因可以促進細胞增殖和克隆形成。本項目擬通過裸鼠成瘤實驗和構建在乳腺中特異表達MAEL的轉基因小鼠，研究MAEL基禁循因在乳腺組織中異位表達對乳腺癌發生髮展的作用。並比較分析人乳腺癌組織和癌旁正常組織、患者和正常人血清中MAEL蛋白表達譜，確定MAEL能否作為乳腺癌的診斷和/或預後標誌物。另外，我們發現MAEL蛋白在乳腺癌細胞中與應激顆粒的主要成分形成蛋白複合物，而應激顆粒是miRNA信號途徑抑制翻譯和/或降解mRNA 的場所。因此，我們還將利用細胞模型和轉基因鼠模型研究MAEL蛋白對應激顆粒形成的影響、鑑定MAEL蛋白調控的靶基因，探討MAEL基因致癌的分子機理。
結題摘要
乳腺癌腫瘤組織符謎腳標本的Western Blot和免疫組化檢測結果表明，MAEL蛋白在癌組織中的表達顯著高於癌旁組織。Oncomine癌基因晶片資料庫分析也發現，在浸潤性乳腺癌、膠質母細胞瘤、胃癌和肺腺癌等癌症的癌組織中MAEL基因的mRNA表達顯著高於相應的正常組織。通過Kaplan-Meier plotter分析，我們發現在腫瘤組織中MAEL基因的mRNA表達高的胃癌患者總體生存率顯著低於MAEL表達低的患者（HR=1.54，p=0.00012），而肺癌（HR=1.07, p=0.4521）、乳腺癌（HR=0.89, p=0.5317）和卵巢癌（HR=1.02, p=0.8494）患者的腫瘤組織中MAEL基因的mRNA表達水平與總體生存率沒有顯著性相關。 構建了定點插入Rosa26位點的MAEL-loxP 轉基因小鼠，並將MAEL-loxP轉基因小鼠與MMTV-Cre轉基因小鼠交配，獲得了在乳腺棵兵洪組織中特異性表達MAEL基因的MMTV-MAEL轉基因小鼠。 並發現MMTV-MAEL轉基因小鼠的乳腺管發育受阻,乳腺管結構稀疏，側管顯著減少，缺少三級和四級管。這些結果與文獻報導的癌基因PTHRP轉基因小鼠的表型一致。這暗示MAEL與PTHRP有同樣的致癌機制，MAEL可能是PTHRP的下游基因。 免疫共沉澱和質譜分析等實驗的結果表明，MAEL蛋白可與許多應激顆粒蛋白相互作用；在雙氧水誘導下，MAEL蛋白與應激顆粒的標誌蛋白PABPC1共定位於應激顆粒中。過表達MAEL顯著降低PABPC1的蛋白水平，而干擾MAEL基因的表達，則PABPC1蛋白水平顯著升高。定量蛋白組學SILAC實驗結果也證實細胞中MAEL蛋白水平與PABPC1的表達呈負相關。進一步研究結果表明MAEL促進PABPC1的溶酶體途徑降解。 我們還發現MAEL蛋白與蛋白磷酸酶ILKAP相互作用，並促進ILKAP的溶酶體途徑降解，從而激活p38。MAEL過表達可以促進細胞增殖、遷移,而過表達ILKAP或用p38抑制劑處理，則可以抑制MAEL介導的細胞增殖和遷移，這說遷台組些結果表明：MAEL通過MAEL-ILKAP-p38信號途徑發揮致癌作用。 最後，我們譽她擊槳篩選並獲潤舉她得三個能有效抑制MAEL基因表達的脫氧核酶。 本項目闡明了MAEL在乳腺癌等癌症中的作用戀諒員和分子機制，為癌症的診斷和抗腫瘤藥物開發奠定了基礎。
