《Nek9基因在人乳腺癌發生髮展中的作用及其分子機制》是依託山東大學，由李麗擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Nek9基因在人乳腺癌發生髮展中的作用及其分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李麗
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
NEK9是NEK蛋白激酶大家族的新成員，NEK9參與G2/M過渡，調節微管運動和染色體分離。研究發現多個NEK成員與腫瘤發生有關，但是尚未發現有關NEK9與腫瘤相關性的報導。課題組對乳腺癌進行螢光原位雜交（FISH）分析，首次發現了Nek9在乳腺癌中廣泛擴增，並且Nek9擴增多見於高級別乳腺癌。本研究將在前期工作的基礎上，檢測乳腺癌細胞系和手術切除乳腺癌組織中Nek9在DNA、mRNA及蛋白水平的表達差異；分析Nek9對中心體複製、染色體分離、細胞生長、細胞周期調控及凋亡的影響，探討NEK9作用的細胞周期調節通路及其與下游NEK蛋白的相互作用，研究Nek9基因擴增/過表達與乳腺癌發生、侵襲及轉移等惡性生物學特徵的關係，證實其致癌作用，初步揭示其作用分子機制，並探討其臨床意義，使之服務於臨床診斷、預後評估及分子治療。該研究對進一步揭示乳腺癌發病機理、判斷預後具有重要的理論價值和臨床意義。
結題摘要
乳腺癌是常見的惡性腫瘤，近年來的發病率逐漸上升，已居女性惡性腫瘤第一位。目前腫瘤轉移仍然是限制乳腺癌患者生存的主要問題所在。研究乳腺癌發生浸潤和轉移的機制，對於準確評估乳腺癌預後、找到新的治療靶點至關重要。Nek激酶家族參與細胞周期關鍵點的調控，可以促進中心粒的成熟，調節染色體的凝集和紡錘的準確組裝。Nek9參與G2/M過渡，調節微管運動和染色體分離，直到近年才有少數NEK9與腫瘤相關性的報導。本研究在前期工作的基礎上，採用免疫組織化學和免疫細胞化學技術檢測了NEK9在乳腺組織和乳腺癌組織/細胞中的表達, 分析不同病變之間的表達差異，探討了Nek9作為分子標記物，為乳腺癌診斷提供依據的可行性；體外實驗研究了Nek9對乳腺癌細胞的增殖、遷移、浸潤、凋亡、細胞周期的影響，初步闡明了Nek9在乳腺癌發生髮展中的作用；通過免疫螢光實驗檢測了Nek9對紡錘體形成和中心粒複製和分離的影響；酵母雙雜交法篩選了與Nek9相互作用的蛋白，免疫共沉澱法驗證了蛋白之間的相互作用；通過動物實驗，分析在體內複雜環境下Nek9對腫瘤的生長及轉移的影響，同時研究了吉西他濱對Nek9表達差異腫瘤的治療影響。本研究證實了Nek9異常表達可導致乳腺癌的發生、進展，初步揭示了其作用分子機制，並探討其臨床意義，為其服務於臨床診斷、預後評估及分子治療奠定了理論基礎。
