Wnt16信號通路在小鼠齶發育及齶裂形成中的作用機制研究

《Wnt16信號通路在小鼠齶發育及齶裂形成中的作用機制研究》是依託武漢大學，由孟柳燕擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：Wnt16信號通路在小鼠齶發育及齶裂形成中的作用機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：孟柳燕
• 依託單位：武漢大學

項目摘要

齶裂是最常見頜面部先天性畸形之一，其病因和發病機制尚不清楚。我們在研究齶裂患兒齶成纖維細胞表型中通過基因晶片技術分析發現WNT16過度表達，而該蛋白在鼠胚齶發育關鍵時期中正常表達於齶間充質，提示Wnt16及其信號通路可能與齶發育以及齶裂的發生密切相關。為了揭示Wnt16信號通路與齶發育的相關性，我們構建Wnt16腺病毒載體和靶向Wnt16 shRNA，轉染鼠胚齶間充質細胞，結合相應通路分子的抑制劑或激活劑，確定Wnt16在該細胞的信號通路；通過羊膜腔內基因轉染，觀察Wnt16腺病毒載體和/或其通路抑制劑作用下，對鼠胚齶發育的影響；體外齶板培養，研究Wnt16信號通路與其他齶發育相關重要信號分子的相互作用。本研究有助於深入認識Wnt16信號通路對齶發育的作用，可能對於齶裂的發生產生新的認識。

結題摘要

齶裂是最常見頜面部先天性畸形之一，其病因和發病機制尚不清楚。我們在研究齶裂患兒齶成纖維細胞表型中通過基因晶片技術分析發現WNT16過度表達，而該蛋白在鼠胚齶發育關鍵時期中正常表達於齶間充質，提示Wnt16及其信號通路可能與齶發育以及齶裂的發生密切相關。為了揭示Wnt16信號通路與齶發育的相關性，我們構建了Wnt16腺病毒載體和Wnt16 siRNA，體外轉染鼠胚齶間充質細胞和齶板，研究結果表明，Wnt16通過經典的Wnt信號通路促進細胞增殖，Wnt16過表達齶板不融合。這部分內容數據尚在整理中。 我們的前期研究表明Wnt16在鼠胚頭部的表達主要位於頭頂骨，鼻中隔，上下頜骨以及齶骨的類骨質，且與成骨標誌物（鹼性磷酸酶，骨鈣蛋白以及鈣鹽）在鼠胚頭部的表達位置一致，提示Wnt16在膜內成骨中發揮作用。為了證明這一點，我們將Wnt16過表達載體轉染小鼠頭頂骨前成骨細胞MC3T3-E1，研究Wnt16對前成骨細胞增殖和分化的作用。研究結果表明：Wnt16不影響成骨細胞增殖，通過Wnt經典信號通路抑制成骨細胞分化。這部分內容已投Journal of cellular physiology雜誌，現已發表。 LiCl可用於治療狂鬱症及白細胞減少症。作為GSK3β抑制劑，LiCl是否會影響齶板的融合以及齶間充質成骨分化。我們將LiCl加入體外培養的齶板，研究結果表明：LiCl下調Wnt16表達，抑制齶板融合以及齶板成骨分化，可能通過經典的Wnt信號通路發揮作用。這部分數據已投遞。