《Wnt信號通路調控MSC向ALI肺泡上皮細胞分化的機制研究》是依託東南大學，由邱海波擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Wnt信號通路調控MSC向ALI肺泡上皮細胞分化的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：邱海波
- 依託單位：東南大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
瀰漫性肺泡上皮細胞損傷是ALI的基本病理改變，有效修復損傷肺泡上皮對治療ALI、改善預後具有決定性影響。外源性間充質幹細胞（MSC）向損傷肺組織歸巢並分化為肺泡上皮細胞，為ALI治療提供了新的途徑，但其低分化率嚴重阻礙了MSC的套用。Wnt通路可能在MSC的上皮分化中起關鍵調控作用，干預該通路有可能從根本上提高MSC對ALI的治療。本研究首先通過體外MSC與ALI肺細胞共培養，觀察激活和抑制Wnt通路對ALI時MSC增殖、侵襲及肺泡上皮分化的影響，明確Wnt經典及非經典途徑可能不同的調控作用；然後通過複製小鼠ALI模型，以激活Wnt通路為切入點，給予β-catenin/Wnt5a基因轉染的MSC，觀察Wnt通路激活對MSC在肺內向肺泡上皮細胞分化，及對肺泡上皮結構與功能的影響，為闡明Wnt通路對MSC在ALI肺泡上皮修復和結構重建中的調節作用提供新的依據，為ALI的細胞治療提供新的思路。
結題摘要
瀰漫性肺泡上皮細胞損傷是急性呼吸窘迫綜合徵（ARDS）的基本病理改變，有效修復損傷肺泡上皮對治療ARDS及改善預後具有關鍵作用。外源性間充質幹細胞（MSC）向損傷肺組織歸巢並分化為肺上皮細胞，為ARDS治療提供了新途徑，但MSC的低歸巢和低分化率嚴重阻礙了MSC的套用。Wnt通路可能在MSC向損傷肺組織遷移和向上皮分化中起關鍵調控作用，有可能從根本上提高MSC對ARDS的治療效果。本研究在體外肺上皮（MLE-12）細胞共培養結合小氣道培養基（SAGM）孵育誘導小鼠MSCs（mMSCs）向ATⅡ細胞分化的模型基礎上，通過經典Wnt途徑配體——Wnt3a及GSK 3β抑制劑——氯化鋰（LiCl）、及LRP5/6 抑制劑DKK 1分別激活或抑制經典Wnt途徑，或通過Wnt5a、SP600125或GF109203X分別激活或抑制非經典Wnt/PKC及Wnt/JNK途徑，觀察經典與非經典Wnt途徑對mMSCs向ATⅡ細胞分化及增殖、遷移和抗損傷等生物活性的影響。結果發現活化經典Wnt途徑能促進mMSCs在體外向ATⅡ細胞的分化，同時促進細胞增殖、向ARDS小鼠肺組織遷移及抗氧化應激誘導的細胞損傷。激活非經典Wnt/JNK或/和Wnt/PKC途徑能促進mMSCs向AT Ⅱ 細胞的分化及向ARDS肺組織的遷移；活化非經典Wnt/PKC途徑能減輕H2O2導致的mMSCs損傷。本研究進一步通過慢病毒介導的β-catenin（經典Wnt通路的關鍵分子）或ROR2基因（非經典Wnt5a/ROR2通路的關鍵分子）轉染，構建長期穩定調控經典或非經典Wnt通路的mMSCs細胞株，在LPS誘導的ARDS小鼠模型基礎上，通過觀察過表達β-catenin或ROR2基因的mMSCs在ARDS小鼠肺內的存留，向Ⅱ型肺泡上皮細胞分化以及肺損傷修復，明確經典和非經典Wnt通路對MSCs在ARDS小鼠肺內的存留，向Ⅱ型肺泡上皮細胞分化及肺損傷修復的調節作用。結果發現活化經典Wnt/β-catenin通路或非經典Wnt5a/ROR2通路均能增加mMSCs在ARDS小鼠肺組織存留，促進mMSCs向ATⅡ細胞分化；增強mMSCs抑制炎症反應的作用；改善肺上皮通透性，從而促進mMSCs修復ARDS肺損傷。
