《Nell-1基因在牽張成骨過程中的作用及其機制研究》是依託北京大學，由何偉擔任負責人的專項基金項目。
基本介紹
- 中文名：Nell-1基因在牽張成骨過程中的作用及其機制研究
- 項目負責人：何偉
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：專項基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
牽張成骨技術已被成功套用於矯治多種顱頜面畸形，但其確切的分子機制尚不十分清楚。Nell-1是一種能夠促進成骨細胞成熟和分化的成骨因子，而Wnt/β-catenin信號轉導通路參與了成骨細胞對機械應力的回響過程。目前未見有關於Nell-1在牽張成骨過程中的作用及其調節機制的研究。本項目提出以下假設：Nell-1參與了牽張成骨新骨生成的過程，並可以促進新骨生成，其作用機制可能與Wnt/β-catenin信號轉導通路有關。本項目擬採用成骨細胞體外牽張模型，分別在給予和不給予Wnt/β-catenin信號通路阻斷劑DKK-1的情況下，檢測Nell-1、Wnt1、Wnt3a及β-catenin等的表達情況，並採用兔下頜骨牽張成骨模型檢測上述基因的表達，旨在探討Nell-1基因在牽張成骨過程中的作用及調節機制，有助於進一步闡明牽張成骨的分子機制，有望為套用基因工程技術促進牽張成骨新骨生成奠定實驗基礎。
結題摘要
研究背景：牽張成骨是目前口腔頜面外科領域一種重要的臨床技術，但其分子學機制目前尚不清楚，還有待進一步研究。Nell-1基因是一種密切參與了機體成骨過程的基因。而Wnt/β-catenin信號轉導通路參與了成骨細胞對機械應力的回響過程。目前未見有關於Nell-1在牽張成骨過程中的作用及其調節機制的研究。本項目提出以下假設：Nell-1參與了成骨細胞對牽張應力應答的生物學過程，並可以促進成骨細胞分化，其作用機制可能與Wnt/β-catenin信號轉導通路有關。 研究目的：研究不同牽張應力及作用時間對大鼠成骨細胞Nell-1蛋白表達的影響。 方法：本研究對體外培養的小鼠成骨細胞分別施加0，2000，20000和100000microstrain大小牽張應力，於牽張後4h、12h採用Western blot法研究Nell-1蛋白表達隨牽張力大小及作用時間的不同而發生的改變，採用Western blot法檢測骨鈣蛋白（osteocalcin，Ocn）蛋白表達水平的改變，採用PNPP法檢測鹼性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALPase）的比活性。 結果：在生理性牽張應力作用下，Nell-1蛋白、Ocn蛋白、ALP的表達隨牽張力的增大而增加。在病理性牽張應力作用下，三者的表達則顯著降低。 結論：Nell-1蛋白參與了成骨細胞將應力刺激信號轉化為生物學信號的過程，可能密切參與了機體牽張成骨的過程。Nell-1基因表達與Wnt/β-catenin信號通路的關係尚需進一步研究。
