《Wnt/β-catenin信號通路對子宮內膜異位症SP細胞的調控研究》是依託四川大學，由朱慧莉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Wnt/β-catenin信號通路對子宮內膜異位症SP細胞的調控研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：朱慧莉
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
子宮內膜異位症嚴重影響育齡婦女的生殖功能和身心健康，但其發病機制至今不明，有學者認為內膜幹細胞可能與發病相關，SP細胞是子宮內膜重要的幹細胞，且可表達VEGF等血管生成因子。本課題組前期通過流式細胞在內異症在位內膜分離出了SP細胞，體外培養形成克隆，呈現典型的幹細胞特徵。同時，Wnt/β-catenin信號通路在內異症中被異常激活，在腸道腫瘤形成過程中該通路可上調VEGF的表達。基於此，本項目擬採用免疫組化、免疫細胞化學染色、 FACS、Western Blot、RT-PCR、細胞增殖遷移實驗及動物實驗、ELISA等實驗方法研究，觀察Wnt/β-catenin信號通路對SP細胞增殖及分化的調控作用，以及SP細胞在內異症血管生成中的作用，從而初步闡明SP細胞在內異症發生中的作用。該研究將為內異症的幹細胞學說提供實驗 依據，也為內異症的診治（如靶向治療）提供新思路。
結題摘要
子宮內膜異位症嚴重影響育齡婦女的生殖功能和身心健康，但其發病機制至今不明，有學者認為內膜幹細胞可能與發病相關，SP細胞是子宮內膜重要的幹細胞，且可表達VEGF等血管生 成因子。本課題組前期通過流式細胞在內異症在位內膜分離出了SP細胞，體外培養形成克隆， 呈現典型的幹細胞特徵。同時，Wnt/β-catenin信號通路在內異症中被異常激活，在腸道腫瘤 形成過程中該通路可上調VEGF的表達。為進一步從幹細胞與血管生成的角度探討內異症的發病機制，我們通過獲取內異症在位內膜組織，進行以下實驗。1、通過免疫組化比較內異症在位內膜和正常人內膜中Wnt、VEGF、β-catenin蛋白的表達；2、通過流式細胞儀檢測獲得細胞的CD44、CD146，ABCG2，Oct-4的表達，鑑定SP細胞表面乾性標記；3、通過軟瓊脂克隆實驗了解SP細胞克隆情況；4、解析了Wnt和β-catenin通路對SP細胞表達VEGF的影響及對SP細胞增殖和遷移活性及分化的影響；5、研究了內異症SP細胞在特定條件下對VEGF分泌表達的影響，闡明了SP細胞在促血管生成中的作用。該研究成功分離並培養了SP細胞，發現在基質膠或軟瓊脂的三維培養基質中，添加SP細胞培養液，我們分離的SP細胞可以在兩周左右形成明顯的克隆團，提示SP細胞可以作為內異症的有效細胞模型，用於該疾病的發病機理及藥物篩選等新藥研發工作。同時我們解析了SP細胞Wnt,β-catenin，VEGF等相關重要分子與通路在SP細胞增殖及遷移中的重要作用，通過Wnt/Catenin通路的阻斷顯著降低SP細胞的增殖和遷移能力，提示該信號通路可能是內異症的潛在治療靶點。該研究為進一步內異症新藥研發及臨床套用奠定了基礎。
