《β-arrestin2與β-catenin作用調控Wnt/β-catenin通路影響乳腺癌多藥耐藥》是依託山東大學，由張慧擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：β-arrestin2與β-catenin作用調控Wnt/β-catenin通路影響乳腺癌多藥耐藥
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張慧
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
多藥耐藥是導致乳腺癌化療失敗的重要原因，MDR1基因編碼的P-糖蛋白（MDR1/P-gp）是逆轉乳腺癌多藥耐藥最重要的靶點。課題組發現乳腺癌細胞中β-arrestin2與MDR1的表達密切相關。MDR1基因是Wnt/β-catenin 通路的直接靶基因，β-arrestin2是該通路的必需作用因子，提示β-arrestin2通過Wnt/β-catenin 通路影響MDR1的表達及乳腺癌多藥耐藥。隨後我們發現在耐藥細胞胞核中β-arrestin2與β-catenin結合，推測二者相互作用結合至特定靶基因的啟動子區並激活轉錄。本課題擬在前期實驗基礎上，明確β-arrestin2/β-catenin相互作用對Wnt/β-catenin通路的影響，尋找關鍵性靶基因和靶蛋白，為β-arrestin2作為遏制乳腺癌惡行性的新靶點提供理論支持和實驗依據。
結題摘要
乳腺癌是世界女性發病率和死亡率最高的惡性腫瘤，新輔助化療已經成為局部晚期乳腺癌標準的初始治療方式。無論在術後化療還是術前新輔助化療，多藥耐藥性的產生都是影響療效的重要因素。Wnt/β-catenin 通路的直接靶基因MDR1基因編碼的P-糖蛋白（MDR1/P-gp）在乳腺癌多藥耐藥中起重要作用。本項目研究發現乳腺癌細胞中β-arrestin2（ARRB2）通過Wnt/β-catenin 通路影響MDR1的表達及乳腺癌多藥耐藥，敏感細胞株經阿黴素誘導後β-arrestin2和MDR1均升高，MDR1的上調還可被Wnt/β-catenin 通路抑制劑XAV939抑制。雙螢光素酶報告基因證實過表達β-arrestin2後Wnt/β-catenin通路的核轉錄因子TCF/LEF轉錄活性上調，即Wnt通路信號激活，導致其靶基因MDR1表達升高。 在浸潤性導管癌患者組織標本中，β-arrestin2與MDR1表達一致，且與未經治療病例相比，在新輔助化療病例中二者表達均明顯升高，進一步提示乳腺癌中β-arrestin2的表達與獲得性耐藥相關。將乳腺癌組織標本中β-arrestin2、MDR1及β-catenin的表達與臨床病理特徵進行相關性分析，β-arrestin2陽性與TILs比例＞10%呈正相關，β-arrestin2陽性腫瘤壞死的比例也更高；而與化療效果及淋巴結轉移的關係受激素受體水平影響。 乳腺癌細胞MCF-7穩定轉染β-arrestin2全長質粒後經Affymetrix GeneChip PrimeView Human Gene Expression Array基因晶片進行mRNA篩選分析，包含了差異基因篩選、聚類分析、GO功能富集分析，KEGG通路富集分析等多個方面。套用這些結果進一步進行GSEA 富集分析差異基因，KM Plot分析β-arrestin2基因高表達與乳腺癌患者生存率的關係，發現整體而言β-arrestin2基因高表達是與生存率正相關的，雌激素受體ER陰性和陽性有所變化。篩選出感興趣的基因經過驗證，過表達β-arrestin2基因後Trps1、ALCAM和GSKIP基因表達均上調，而GSK3β和CynlinD1基因下調，或可解釋β-arrestin2高表達的乳腺癌耐藥性增強但淋巴結轉移率低且整體預後較好，今後兩年將進一步深入研究其機制。
