《Wnt/β-catenin信號通路介導microRNAs調控食管癌幹細胞放射敏感性研究》是依託西安交通大學，由張曉智擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Wnt/β-catenin信號通路介導microRNAs調控食管癌幹細胞放射敏感性研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張曉智
- 依託單位：西安交通大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
我們前期實驗發現，食管癌細胞株經反覆X-ray照射後, 具有幹細胞特性的細胞逐漸富集，結合腫瘤幹細胞理論，認為腫瘤幹細胞對放射線抗拒是食管癌放療失敗的根本原因；通過高通量微陣列篩選出食管癌幹細胞與非幹細胞差異表達的microRNA，推測這些microRNA與食管癌幹細胞生物學特性有關，能調控其放射敏感性，這一作用可能通過Wnt/β-catenin信號通路介導實現。本項目擬在前期研究的基礎上，利用分子生物學技術調控相關microRNA在食管癌幹細胞中的表達，通過體內外實驗觀察對腫瘤幹細胞放射敏感性的影響，同時檢測Wnt/β-catenin信號通路中重要的蛋白及信號分子，明確其激活情況，最終證實對相關microRNA可調控食管癌幹細胞放射敏感性，且這一效應是通過Wnt/β-catenin信號通路介導的。本研究將為靶向腫瘤幹細胞的放射增敏效應提供理論依據，為食管癌放射抗拒的逆轉提供新思路。
結題摘要
我們前期實驗發現，食管癌細胞株經反覆X-ray照射後, 具有幹細胞特性的細胞逐漸富集，結合腫瘤幹細胞理論，認為腫瘤幹細胞對放射線抗拒是食管癌放療失敗的根本原因；通過高通量微陣列篩選出食管癌幹細胞與非幹細胞差異表達的microRNA，推測這些microRNA與食管癌幹細胞生物學特性有關，能調控其放射敏感性，這一作用可能通過Wnt/β-catenin信號通路介導實現。本項目在前期研究的基礎上， 研究發現放射線聯合無血清懸浮培養具有較好的食管鱗癌幹細胞富集作用，這种放射抗拒幹細胞中P75NTR+細胞比例明顯增加（~10倍），放射抗拒細胞顯示較原代細胞更強的放射抗拒能力、增殖能力、侵襲能力、ROS清除及對細胞周期阻滯的抵抗能力，並且具有更高活性的wnt通路。進一步檢測發現，wnt通路的高活性具有調節食管癌放射抗拒細胞的放射敏感性及幹細胞比例的作用。因此，我們對比研究放射抗拒食管鱗癌細胞與wnt通路活化的食管鱗癌細胞發現，其中部分miRNA表達變異具有相關性。這些差異表達的miRNA，我們在術前患者標本中進行了檢測，並隨訪了放療前中後患者血清中相應miRNA表達量的改變，希望可以獲得其與臨床預後相關的一線資料。同時，我們也通過構建慢病毒載體及脂質體方式，調控miR-21、miR-200c和miR-210。我們研究確定miR-21對食管放射抗拒細胞具有放射增敏效果，且該效果系通過wnt通路及PTEN作用的。而miR-200c也顯示出顯著的放射增敏效果。基於miR-210與活性氧代謝的關係及我們研究中發現的ROS在食管鱗癌放射抗拒細胞放射敏感性中的重要作用，我們現在研其相關性。本研究的現有結果及進一步結果的發表具有推進放射敏感、miRNA、wnt通路及ROS代謝相關的食管鱗癌幹細胞樣細胞研究進展，對食管癌放射增敏的治療提供可能的靶點，並可能提供出具有預後觀察意義的臨床指標。
