《WnT/β-catenin通路在實驗性近視中的作用機制及調控研究》是依託上海交通大學，由柯碧蓮擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：WnT/β-catenin通路在實驗性近視中的作用機制及調控研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：柯碧蓮
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
近視是一種眼球過度發育性眼病。WnT是胚胎時期調控眼球發育的重要信號分子，在成年視網膜仍有表達並對眼球的生長起調節作用。課題組前期研究發現，小鼠形覺剝奪性近視（FDM）的視網膜中WnT2b、β-catenin及膜型捲曲蛋白5（MFRP5）表達上調，且與近視的程度呈正相關，但其在近視發生中的作用不清。為此，本項目分別採用基因晶片技術、免疫螢光、定量PCR及Western-blot等方法，檢測FDM中WnT/MFRP各亞型的表達、表達部位及變化規律，觀察其與近視發生的關係，並闡明其表達變化的機制；分別實施玻璃體腔注射WnT抑制劑DKK1和激活劑SB-2167631進行雙向干預，觀察其對近視的作用，分析WnT/β-catenin/MFRP、T細胞因子/淋巴細胞增強因子、視黃酸和轉化生長因子β的表達，闡明調控WnT通路對近視的作用及其機制，為發現近視干預的可能有效靶點及研製新型抗近視藥物奠定基礎。
結題摘要
本課題成功構建了豚鼠形覺剝奪性近視模型，基因晶片研究表明Wnt家族中Wnt3亞型在形覺剝奪近視組的表達高於對照組2.13倍，進一步採用Western-blot方法對鞏膜和視網膜組織檢測，發現：與對照組相比，近視組Wnt3在蛋白水平表達也顯著增加，這與基因晶片結果一致，這為本課題後續的體內體外研究奠定了基礎。而且，我們進一步關注Wnt通路在近視調控中的機制和對鞏膜膠原重塑的影響。在離體培養的鞏膜成纖維細胞研究中發現：①近視組Wnt3和β-catenin蛋白表達均顯著增加，加入DKK-1（Wnt通路抑制劑）干預後Wnt3和β-catenin的表達降低；②近視組細胞上清液的TGF-β1較對照組顯著降低，加入DKK-1後近視組TGF-β1的表達增加，加入TGF-β1中和抗體後近視組TGF-β1的表達進一步降低；③近視組I型膠原蛋白較對照組顯著降低，加入DKK-1後表達增加。在加入TGF-β1中和抗體後，I型膠原蛋白表達進一步降低。在體的研究表明：豚鼠近視組Wnt3及β-catenin增加，I型膠原蛋白降低。DKK-1干預後Wnt3及β-catenin表達降低，而I型膠原蛋白有所增加。TGF-β1中和抗體干預後I型膠原蛋白表達進一步降低。以上離體和在體的研究均表明：實驗性近視中Wnt3/β-catenin信號通路激活，通過調控鞏膜的TGF-β1來影響I型膠原蛋白的表達，從而影響鞏膜的重塑過程。本項目的研究成果可為尋求近視的新的干預靶點提供有價值的實驗室依據。受本課題資助已發表論著4篇，其中SCI收錄 3篇。培養博士3名，碩士1名。
