《MiR-155調控在椎間盤退變中的作用研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由王海強擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MiR-155調控在椎間盤退變中的作用研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王海強
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
椎間盤退變發病機理與椎間盤組織的免疫赦免狀態被打破有關，具體分子機制尚不清楚。Fas、FasL及其下游的FADD均為體內維持免疫系統平衡的關鍵分子。MiR-155通過靶向性結合FADD mRNA抑制FADD表達而在調控機體免疫系統方面發揮重要作用。但FADD及miR-155在椎間盤退變中的作用未見報導。我們前期microRNA晶片研究發現miR-155在退變椎間盤髓核細胞中表達明顯降低。本課題擬在上述發現基礎上，在椎間盤組織中考察miR155分布，FADD的表達及活化；明確NK細胞參與椎間盤退變的免疫損傷過程；明確miR-155在椎間盤髓核細胞，以及局部浸潤的免疫細胞中，可下調FADD的表達，進而抑制Caspase8活化及後續的細胞凋亡信號轉導；明確miR-155對髓核細胞及免疫細胞凋亡的調節作用。以期初步闡明椎間盤退變過程中的免疫失衡機制，並有可能為臨床上治療椎間盤退變提供新的治療靶點。
結題摘要
椎間盤退變時細胞凋亡增加的確切分子機制尚不清楚。研究表明，細胞凋亡受microRNA (miRNAs)的調控。Fas、FasL及其下游的FADD、caspase-3均為體內凋亡通路的關鍵分子。我們率先明確了人椎間盤退變miRNAs的表達譜，篩選出29個差異表達的miRNAs，其中miR-155在退變椎間盤髓核細胞中下調明顯，並通過RT-PCR驗證了其下調（0.56倍，P＜0.05）。生物信息學預測提示FADD和CASP3可能為miR-155的潛在靶基因。我們以LNA-ISH、IHC及雙標法在椎間盤髓核組織中明確了miR-155分布於髓核細胞胞漿中，FADD，Caspase-3分布於髓核細胞胞漿近膜處，且miR-155與靶蛋白呈相反分布；明確了免疫細胞（單核細胞和淋巴細胞）參與椎間盤退變的免疫損傷過程；在體外通過調控miR-155的表達，可調控髓核細胞中FADD和caspase-3的表達，進而調控髓核細胞的凋亡。綜上所述，人椎間盤退變時髓核中下調的miR-155通過對靶基因FADD和CASP3的靶向調控，促進了Fas介導的細胞凋亡(J Pathology, 2011, 225:232-242)，初步闡明了椎間盤退變過程中的凋亡增加的分子機制，為臨床上治療椎間盤退變提供新的治療靶點。針對髓核及纖維環細胞的研究發現：退變髓核細胞大部分為活的組織細胞；纖維環細胞有與髓核細胞類似的超微結構及吞噬功能，糖代謝的紊亂可能是退變髓核中的長突起細胞的成因之一。針對退變退變髓細胞簇的研究發現角蛋白8（CK8）隨髓核退變而表達降低，可能是細胞簇形成原因之一。
