《MicroRNA-155調控急性心肌梗死後室性心律失常的機制研究》是依託武漢大學，由黃鶴擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MicroRNA-155調控急性心肌梗死後室性心律失常的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：黃鶴
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
室性心律失常（VAs）是急性心肌梗死（AMI）患者猝死的主要原因，其重要電生理機制為心肌細胞離子通道和轉運體表達和功能異常。MicroRNA-155(miR-155)可直接調控細胞膜鈉通道、鈣通道和鈣泵的基因表達，在AMI 後心室肌表達顯著升高。我們的預實驗研究顯示，miR-155 基因敲除小鼠其心室肌L 型鈣電流顯著增大，動作電位時程明顯延長，提示miR-155 可能對VAs 有重要調控作用，但目前尚無相關研究報導。有鑒於此，本項目擬運用miR-155 基因敲除小鼠和心臟特異性miR-155 過表達小鼠，通過在體、離體和細胞水平的電生理研究，結合分子生物學研究，對miR-155 在AMI 後急性期和慢性期VAs中的作用及其機制展開系統研究，力圖明確miR-155 對AMI 後不同階段VAs 的影響及其機制，為有效防治AMI 後VAs 提供實驗室依據和新靶點。
結題摘要
心臟重構是急性心肌梗死後的重要病理特徵，是導致室性心律失常的重要基礎，但其具有分子機制尚完全闡明，亦缺乏有效的防治方法。既往研究發現急性心肌梗死患者血清中MicroRNA-155（miR-155）的表達顯著上調，但其作用和機制尚不明確。本項目主要內容包括：（1）利用miR-155過表達和miR-155敲除小鼠，通過結紮小鼠冠狀動脈前降支（LAD）建立急性心肌梗死模型，觀察miR-155對急性心肌梗死後的心室重構的影響。結果顯示：與野生型小鼠相比，miR-155基因敲除小鼠心梗後心功能改善、梗死面積減小、相對瘢痕厚度增加、左室擴張指數降低、心肌中腦鈉素（BNP）和心肌肌鈣蛋白I（cTnI）表達減少，miR-155過表達小鼠則呈現相反效應；（2）分離miR-155過表達和miR-155敲除小鼠心肌梗死14天后的心臟成纖維細胞和心肌細胞，探討miR-155對小鼠心臟成纖維細胞膠原蛋白合成、凋亡、增殖和表型轉化等生物行為的影響。結果顯示：心肌細胞和心臟成纖維細胞中腫瘤p53蛋白誘導核蛋白1（TP53INP1）的表達在miR-155過表達小鼠心梗後顯著下調，而miR-155敲除小鼠顯著上調。miR-155敲除抑制心臟成纖維細胞的增殖，減輕轉化生長因子-β1（TGF-β1）介導的心臟成纖維細胞collagen I/III上調和caspase3下調，miR-155過表達則呈現相反效應。（3）通過生物信息學預測miR-155的靶基因並用螢光素酶報告基因檢測驗證。miR-155模擬物或抑制劑轉染乳鼠心臟成纖維細胞，檢測miR-155對心臟成纖維細胞中TP53INP1表達的影響。結果顯示：生物信息學預測TP53INP1是miR-155的靶基因，螢光素酶報告基因實驗顯示miR-155能與TP53INP1基因3’-UTR結合。心臟成纖維細胞中miR-155模擬物顯著抑制TP53INP1表達，而miR-155抑制劑則呈現相反效應。TP53INP1 沉默促進心臟成纖維細胞的增殖、I/III型膠原蛋白合成。本項目研究結果提示miR-155通過靶基因TP53INP1調節心臟成纖維細胞的生物學特性，從而影響心臟重構的發生髮展，可能是防治心臟重構及心肌梗死後室性心律失常的重要靶點。
