《miR-155在系統性紅斑狼瘡發生中的作用及表達調控機制》是依託山東大學，由劉奇蹟擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：miR-155在系統性紅斑狼瘡發生中的作用及表達調控機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉奇蹟
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
miR-155是一個在自身免疫病發生過程中起重要作用的microRNAs，但在Th17分化及系統性紅斑狼瘡(SLE)發生中的機制並不明確。我們前期研究發現，miR-155在SLE中高表達且與IL17A表達水平正相關，與ETS1表達負相關，過表達miR-155可下調ETS1的表達。據此，課題組提出假設：轉錄因子表達水平或結合能力的改變、甲基化、乙醯化等機制導致miR-155表達上調，進而抑制了Th17的負調控因子ETS1等的表達水平，從而促進Th17的分化，進而導致SLE的發生髮展,抑制miR-155的表達或可緩解SLE的發生髮展。為驗證該假設，課題組將利用過表達miR-155與敲除miR-155的MRL/lpr狼瘡小鼠模型在體內研究miR-155導致疾病發生的具體機制，體外與體內實驗結合臨床標本分析miR-155的上游表達調控機制，探索miR-155在SLE中的潛在診斷與治療價值。
結題摘要
為了明確miR-155在SLE發生髮展中的作用，我們分別選取野生對照小鼠、Faslpr/lpr狼瘡小鼠和miR-155-/- Faslpr/lpr小鼠進行了分析，結果顯示， Faslpr/lpr狼瘡小鼠脾腫大症狀明顯， 40-50周齡的miR-155-/- Faslpr/lpr小鼠尿蛋白水平低於Faslpr/lpr狼瘡小鼠。Faslpr/lpr小鼠的腎臟組織結構紊亂，腎小球增大，腎小球毛細血管基底膜增厚，有明顯的炎性細胞浸潤。腎臟中IgM，IgA和C1q的沉積減少。脾臟和淋巴結中CD4+（CD4+CD69+）T細胞比例明顯增加，狼瘡小鼠脾臟中有自發生髮中心的形成，ELISA實驗結果也證實miR-155-/- Faslpr/lpr小鼠淋巴結中Tfh細胞的比例減少，上述結果表明敲除miR-155可緩解Faslpr/lpr小鼠的狼瘡樣表型。利用表達譜晶片對miR-155-/-小鼠和野生小鼠的脾臟表達譜進行了差異分析。對晶片結果進行分析，發現與野生型小鼠脾臟相比，miR-155-/-小鼠脾臟存在544個基因表達上調和508個基因表達下調（基因表達存在兩倍差異並且P＜0.05）。利用螢光素酶報告基因技術證實了S1PR1是miR-155的一個靶基因。利用S1PR1的特異性拮抗劑W146連續三天腹腔注射miR-155-/- Faslpr/lpr小鼠，並對小鼠細胞學水平的表型進行了流式檢測。結果發現與DMSO處理組小鼠相比，W146處理組miR-155-/-Faslpr/lpr小鼠的脾臟和淋巴結中CD4+/CD8+比例異常增加，活化的CD4+T細胞比例增多，並且淋巴結中Tfh細胞的比例增加，這提示S1PR1特異性拮抗劑W146可加重miR-155-/- Faslpr/lpr小鼠的狼瘡樣表型。以上結果證實了mir-155通過調控S1PR1參與了SLE的發生髮展。
