miR155調控乳腺癌內分泌耐藥的研究

《miR155調控乳腺癌內分泌耐藥的研究》是依託中山大學，由賈衛娟擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：miR155調控乳腺癌內分泌耐藥的研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：賈衛娟
• 依託單位：中山大學

中文摘要

內分泌耐藥是乳腺癌治療面臨的重要臨床問題。microRNAs（miRNA）是近年發現的真核生物體內一類非編碼的小分子RNAs,參與了生物各種生命活動的調節，也與腫瘤細胞的耐藥性有關。我們前期的研究通過高通量的miRNAs晶片檢測MCF7細胞株和三苯氧胺耐藥MCF7細胞株（MCF7/TAM）的miRNAs表達譜，發現它們之間21種miRNAs表達有顯著差異，再通過qRT- PCR驗證。預試驗發現miR155在MCF7/TAM中過表達與內分泌耐藥有關。所以本研究中我們將通過干預miR155的表達，在體外和體內試驗中，觀察乳腺癌細胞株對內分泌治療的敏感性。預測和驗證miR155的靶向基因，研究其靶向基因參與乳腺癌內分泌耐藥的機制。收集臨床內分泌治療敏感和失敗的病例，通過原位雜交和qRT-PCR技術檢查石蠟和新鮮組織中miR155的表達與內分泌治療耐藥的關係。本研究為乳腺癌內分泌治療提供了新思路。

結題摘要

乳腺癌是婦女最常見的惡性腫瘤，三分之二乳腺癌表現為雌激素受體（ER）陽性，ER促進這些腫瘤的生長和發展。而套用ER調節劑如他莫昔芬(TAM)等藥物可以使這群乳腺癌患者受益。但是，有一些婦女卻因為原發性或繼發性TAM耐藥導致了疾病的復發或進展。最近的研究發現小分子RNA(miRNAs)在所有主要的細胞進程中都起了關鍵性的作用。我們的研究也發現在TAM耐藥的乳腺癌細胞株中大部分miRNAs為高表達，尤其是miR155。我們套用高通量microRNA晶片檢查MCF-7細胞株和MCF-7他莫昔芬耐藥株（MCF-7/TAM）細胞中miRNAs表達譜。MCF-7/TAM細胞中表達miRNAs分子相對於MCF-7細胞多，總體呈上調趨勢。這些特點反映了細胞之間存在生物學性質上的差異。 qRT-PCR檢測結果同miRNAs晶片檢測結果一致。進一步套用Northern blotting實驗來驗證了這兩種細胞株中miR155表達的差別。細胞增殖實驗和流式細胞凋亡檢測驗證了miR155表達異常與TAM的敏感性有關。Western Blotting檢測BACH1的表達水平與miR155的表達水平成反比。MiR155靶向抑制BACH1導致4-OH-TAM耐藥的機制，可能是通過上調C-Myc的表達引起。細胞增殖和凋亡實驗也驗證了BACH與TAM耐藥有關。原位雜交檢查和qRT-PCR檢測他莫昔芬耐藥的ER+ HER-2+乳腺癌患者的原髮乳腺癌標本中miR155的表達水平顯著高於TAM敏感的ER+ HER-2-乳腺癌患者。本研究證實了miRNAs參與了乳腺癌內分泌耐藥的調控，而且miR155調控TAM耐藥是通過調控BACH蛋白的表達來實現。臨床病例也證實TAM耐藥的患者miR155高表達。