《骨髓源性巨噬細胞microRNA-155對動脈粥樣硬化的調控機制》是依託武漢大學，由杜芬擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：骨髓源性巨噬細胞microRNA-155對動脈粥樣硬化的調控機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：杜芬
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
microRNA-155(miR-155)由Bic基因的外顯子編碼，參與調節細胞炎症反應，在巨噬細胞中表達量較高。我們前期研究發現miR-155在小鼠和人類動脈粥樣硬化(AS)斑塊中高表達。apoE-/-小鼠miR-155-/-巨噬細胞炎症因子表達降低，細胞炎性反應降低起主導作用，AS斑塊減少；而骨髓細胞miR-155-/-的LDLR-/-小鼠血漿炎症因子水平未見明顯改變，但AS斑塊中巨噬細胞凋亡率增加以致斑塊生成增加。我們推測模型小鼠細胞基因型以及脂蛋白血症的差異，導致微環境改變下巨噬細胞miR-155靶基因的表達水平變化，miR-155靶向性發生改變，從而影響巨噬細胞功能。我們擬關注在不同基因型細胞或在不同脂蛋白血症環境下細胞miR-155靶向性變化，系統性研究骨髓源性巨噬細胞miR-155在不同微環境下調控細胞功能的動態機制，此研究將有利於尋找針對性治療AS的新策略。
結題摘要
本項目關注微環境對細胞中miR-155作用靶向性的影響機制，結合骨髓移植實驗系統性研究骨髓源性巨噬細胞miR-155在不同微環境下調控細胞功能的動態機制。通過骨髓移植驗證骨髓源性巨噬細胞miR-155-/-對LDLR-/-模型小鼠的AS斑塊形成的影響，結果顯示巨噬細胞miR155缺陷的小鼠主動脈弓部，主動脈根部AS斑塊面積均升高，免疫組化分析斑塊細胞組成，發現斑塊中巨噬細胞比例增加，凋亡細胞增加，壞死中心增加。進一步利用免疫螢光組織學分析分析發現AS斑塊中miR-155的靶標蛋白FOXO3a表達量增加。流式細胞儀檢測顯示骨髓細胞miR-155-/-的LDLR-/-小鼠脾臟細胞中調控型T細胞比例明顯降低。細胞實驗發現LPS刺激不同基因型小鼠腹腔巨噬細胞中miR-155均升高，但LDLR-/-小鼠比apoE-/-/LDLR-/-小鼠低約10倍，提示LDLR-/-小鼠AS發生中miR-155並不是主要通過影響炎症反應發揮作用。我們認為在LDLR-/-小鼠中，miR-155主要通過促進細胞凋亡增加AS斑塊。結合生物信息學分析我們進一步檢測巨噬細胞中miR-155對其他非編碼RNA表達的影響，發現LDLR-/-小鼠腹腔巨噬細胞中與miR-155相關的lncRNAs的表達明顯高於WT小鼠。同時檢測到lncRNA NORAD沉默的HUVEC細胞中FOXO3a表達降低並影響了細胞的炎症反應。另外我們擴展了該項目，研究通過調控非編碼RNA表達影響AS發生的機制，發現原花青素可通過刺激miR-30a和miR-101表達，影響自噬發生，從而抑制AS斑塊形成。
