《炎症微環境刺激肝癌發生與發展的關鍵調控分子的研究》是依託廈門大學，由楊天賜擔任項目負責人的重大研究計畫。
基本介紹
- 中文名：炎症微環境刺激肝癌發生與發展的關鍵調控分子的研究
- 項目類別：重大研究計畫
- 項目負責人：楊天賜
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
慢性炎症可誘發或促進腫瘤的發展這一概念已被廣泛接受，但其關鍵調控節點及分子機制尚未闡明。前期工作中，我們鑑定了部分炎症刺激差異表達蛋白，對其功能以及與其它蛋白質間的作用進行了分析，構建了模擬慢性炎症微環境的體外肝細胞培養體系和肝癌移植瘤小鼠模型。本項目擬以人肝癌臨床標本、炎症微環境培養細胞、以及炎症-肝癌移植瘤小鼠模型為研究對象，套用蛋白質組學、分子生物學等手段，對正常肝細胞、永生化肝細胞和肝癌細胞在慢性炎症微環境刺激下的增殖、遷移、惡性表型等生物學性狀，以及蛋白表達譜變化、蛋白磷酸化水平變化進行系統比較。研究炎症微環境對細胞惡性轉化的影響，篩選慢性炎症刺激誘導細胞惡性轉化的關鍵調控蛋白，通過蛋白質相互作用研究方法，研究這些關鍵調控蛋白質相互作用分子網路。在整體的水平上，揭示炎症促進細胞惡性轉化的關鍵調控蛋白及其分子調控機制，闡明炎症刺激細胞惡性轉化的分子調控網路。
結題摘要
本項目研究，經過三年的工作，基本取得了預期成果。主要成果如下： 1.建立了比較符合本研究目標的動物模型——DEN誘導肝原位成瘤-炎症刺激的小鼠模型和SD大鼠模型，可以較好的模擬非可控性炎症促細胞癌變的進程，並取得符合研究目標要求的樣品，並進行了病理分析。對癌變前炎症期及肝硬化期的多種癌變進程相關的基因表達進行了定量分析。 2.以蛋白質組學和代謝組學技術手段，取得了肝癌發生炎症期與硬化期階段小鼠肝臟蛋白質組的變化與代謝組變化的初步數據。 代謝組學研究共檢測到65種差異物質。分析發現在癌變前肝病變過程中，抑制炎症通路，可降低碳代謝，而在硬化期促進炎症可促進脂代謝，硬化期炎症促使碳代謝向脂代謝和胺基酸代謝轉化。而我們從小鼠肝組織細胞中發現具顯著差異的代謝產物中，D-glucose和D-mannitol兩個具有很大的潛能來作為HCC前期診斷的生物標誌物。 蛋白質組學研究檢測鑑定了炎症期的八十多個差異表達蛋白質點，並進行了生物信息學分析。信息學分析結果顯示，差異表達蛋白主要參與了脂類代謝和分子運輸等功能的調控。分析顯示這些差異蛋白主要參與了細胞抗氧化和解毒過程，包括Glutathione-mediated Detoxification，NRF2-mediated Oxidative Stress Response，LPS/IL-1 Mediated Inhibition of RXR Function等涉及細胞抗氧化和解毒過程的信號通路，毒性分析結果顯示肝臟組織可能發生了肝細胞粘附（liver adhesion）和肝損傷。分析結果表明在DEN誘導肝癌的病變過程中，加入PDTC抑制炎症通路，導致了肝內氧化脅迫和谷胱甘肽消耗減少，而加入LPS增強炎症通路則導致了肝內氧化脅迫和谷胱甘肽消耗的加劇。然而DEN+PDTC組在肝組織增生和肝癌病變的程度卻並未比其他兩組減弱，反而較之有所增強。這提示我們過分抑制癌變前的炎症通路或增強炎症通路都可能促進癌症的發生。 本培育項目，建立了切中研究計畫目標的的小鼠模型，套用蛋白質組學、代謝組學和生物信息學分析相結合的新方法，結合各種分子細胞生物學研究手段，已初步獲得了非可控性炎症促進細胞癌變過程中的蛋白質組學信息和代謝組學數據。本項目後續研究工作，擬進一步利用更為準確的定量蛋白質組技術對癌變過程蛋白質分子變化和蛋白質修飾變化進行研究。隨著
