microRNA-139-5p在結直腸癌發生髮展中的作用及其機制研究

《microRNA-139-5p在結直腸癌發生髮展中的作用及其機制研究》是依託蘇州大學，由黃朝暉擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：microRNA-139-5p在結直腸癌發生髮展中的作用及其機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：黃朝暉
• 依託單位：蘇州大學

項目摘要

結直腸癌(CRC)是最常見的惡性腫瘤之一。microRNA（miRNA）是一大類參與基因轉錄後調控的非編碼小分子RNA，與腫瘤的發生、發展密切相關。申請者前期研究發現，miR-139-5p在CRC組織中顯著下調，且具有抑制CRC生長的作用，提示其可能是一個新的抑癌基因。本項目擬在此基礎上，套用細胞分子生物學、實驗動物學等手段從體外細胞水平及活體水平進一步研究miR-139-5p對CRC細胞惡性表型及癌變相關的細胞生命活動的影響，並進一步鑑定其靶基因，以闡明miR-139-5p調控CRC發生髮展的分子機制; 同時結合臨床標本，分析miR-139-5p和CRC患者預後及腫瘤臨床病理表型的關係，評估miR-139-5p表達在指導治療、判斷預後中的臨床套用價值。研究結果可為解釋CRC的發病機制及防治在miRNA調節水平提供理論和實驗依據，並為CRC的診斷、治療和預後提供重要指導。

結題摘要

結直腸癌(CRC)是最常見的惡性腫瘤之一。microRNA（miRNA）是一大類參與基因轉錄後調控的非編碼小分子RNA，與腫瘤的發生、發展密切相關。本項目在前期表達譜晶片研究中發現miR-139-5p在CRC組織中顯著下調的基礎上，進一步運用定量PCR技術檢測了158例CRC組織中miR-139-5p的表達情況，發現與癌旁組織相比，miR-139-5p在腫瘤組織中的表達顯著下降，進一步臨床關聯分析發現miR-139-5p表達下調患者的總生存期顯著縮短，且多因素分析顯示miR-139-5p表達是CRC患者的獨立預後因素。功能研究發現 miR-139-5p過表達能夠顯著抑制CRC細胞的體外遷移和侵襲能力，抑制miR-139-5p表達則促進CRC細胞的體外遷移和侵襲能力。動物實驗進一步證實miR-139-5p過表達能夠顯著抑制CRC細胞的活體轉移能力。體內、體外實驗未發現miR-139-5p表達對CRC細胞的增殖能力有顯著影響。運用表達譜晶片、軟體預測以及螢光素酶實驗、Western blotting等實驗手段發現AMFR和NOTCH1基因是miR-139-5p在CRC中的功能性靶點；siRNA介導的AMFR和NOTCH1表達抑制可以模仿miR-139-5p的功能。免疫組化檢測顯示，CRC組織中AMFR和NOTCH1蛋白的表達均顯著上調，且與miR-139-5p的表達水平呈顯著負相關。綜上所述，miR-139-5p能夠通過靶向抑制AMFR和NOTCH1發揮抑制CRC細胞遷移和侵襲的功能, miR-139-5p表達是CRC的獨立預後因子。