《miR221/222參與妊娠期糖尿病致子代異常的作用及機制研究》是依託上海交通大學，由范建霞擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：miR221/222參與妊娠期糖尿病致子代異常的作用及機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：范建霞
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
妊娠期糖尿病（GDM）是妊娠期重要的代謝性疾病，可造成不良妊娠結局並危及胎兒健康。表觀遺傳學機制在GDM宮內高糖環境致子代不良結局中扮演重要角色。我們前期工作中在妊娠小鼠模型及妊娠期糖尿病患者血清樣本中篩選出差異表達的microRNA, 其中miR221/222變化最為顯著，且miR221/222在全身各組織廣泛表達。靶基因預測及驗證實驗發現，miR221/222過表達可抑制細胞增殖相關基因PTEN和P27表達。結果表明miR221/222是妊娠前後以及妊娠糖尿病病理過程中變化明顯的高度保守性microRNA, 極有可能通過調控下游靶基因表達影響子代發育及代謝。本項目旨在前期重要發現的基礎上，套用臨床生物樣本和妊娠期糖尿病小鼠模型，從體內、體外水平探討妊娠期糖尿病宮內高糖環境影響子代生長發育的miR221/222表觀遺傳調控機制，為宮內不良環境所致子代疾病發生實現源頭控制提供理論基礎。
結題摘要
目的：胎盤娩出後妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus, GDM）伴隨的病理生理改變隨即減退或消失。因此可以認定胎盤在GDM的病理改變中起著至關重要的作用。本研究通過探討GDM胎盤中microRNA（miRNA）及其相應靶基因的差異表達，並同時探究miR-138-5p及其靶基因TBL1X在GDM發生髮展中的作用，以期為GDM的發生機制提供理論依據。 方法：運用RNA-sequencing（RNA-seq）方法對8例GDM胎盤和8例正常組胎盤樣本進行了miRNA及mRNA測序，獲得GDM和對照組miRNA及mRNA表達譜。套用real-time PCR技術驗證差異表達miRNA以及mRNA。套用劃痕試驗、transwell實驗以及CCK-8檢測細胞遷移以及增殖能力的改變。套用雙螢光素報告酶實驗驗證TBL1X是miR-138-5p的靶基因。 結果:（1）共篩選到281個差異miRNA以及32個差異mRNA，其中204個mRNA以及9個miRNA在GDM胎盤組織中上調，77個mRNA以及23個miRNAs在胎盤組織中下調。（2）運用real-time PCR技術在20例GDM胎盤以及18例正常胎盤獨立樣本中進行驗證，被選為驗證的6個miRNA以及10個mRNA中，5 miRNAs以及8 mRNAs驗證成功，包括5個上調的 mRNAs （TBL1X, NOTUM, FRMD4A, SLC16A2 and CLDN19） 以及 1個下調的 miRNA （miR-202-5p）, 3個下調的 mRNAs （CCL18, HTRA1, SLC39A6） 和 4 個下調的 miRNAs （miR-138-5p, miR-210-5p, miR-3158-5p and miR-4732-3p）。（3）通過對配對的miRNAs/mRNAs進行生物信息學分析，其功能主要涉及細胞發育及功能、器官形態等方面。（3）miR-138-5p通過結合靶基因TBL1X改變滋養層細胞的遷移以及增殖功能。（4）胎盤中miR-138-5p與TBL1X表達水平與母體血糖水平及胎盤重量相關。 結論：本研究首次獲得了GDM胎盤組織中差異miRNA及mRNA表達譜。同時深入闡述了miR-138-5p及其靶基因TBL1X在GDM病理機制中的作用。
