《microRNA129-5p對PD腹膜組織細胞EMT的作用與分子機制》是依託中南大學，由肖力擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：microRNA129-5p對PD腹膜組織細胞EMT的作用與分子機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：肖力
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
長期接受腹膜透析（PD）的腹膜組織常出現腹膜纖維化而降低透析效能，但其原因尚不清楚。近期研究證明TGF-β1介導的上皮細胞轉分化（EMT）在其中可能起關鍵作用。小分子miRNA是TGF-β1信號通路中新發現的調控分子，故從miRNA入手研究TGF-β1信號分子轉錄調控是近期生命科學研究的熱點。我們研究發現：在PD過程中異常表達的miRNA可能介導TGF-β1誘導的腹膜間皮細胞EMT形成。本項目結合申請者以往的研究基礎，以miRNA-129-5p為切入點，以TGF-β1下游的SIP1為靶蛋白，以PD過程中腹膜間皮細胞EMT為主攻方向，用分子生物學技術，探討TGF-β1誘導miRNA-129-5p及miRNA-129-5p對轉錄因子SIP1表達調控的分子機制，並構建、純化miRNA-129-5p慢病毒，觀察其對PD動物模型腹膜組織EMT的影響，旨為防治PD腹膜纖維化提供新的理論基礎與干預措施。
結題摘要
miRNA是否參與腹透（PD）腹膜間皮細胞（HPMCs）轉分化（EMT）尚不清楚。在本項目資助下，我們開展了PD患者腹透流出液腹膜間皮細胞microRNA array，對miR-129-5p調節TGF-β1誘導的HPMCs細胞EMT展開研究。發現91個 microRNA表達異常，miRNA-129-5p明顯下降；上皮標誌物E-cadherin和claudin1表達下降，間皮標誌物Vimentin、FN表達增加， TGF-β1、SIP1、SOX4表達增加。體外研究表明：TGF-β1引起HPMCs細胞miR-129-5p表達下降，而pre-miRNA-129-5p可減輕HPMCs轉分化。進一步發現，pre-miRNA-129-5p可抑制TGF-β1誘導的SIP1和SOX4蛋白高表達，SIP1-siRNA和SOX4-siRNA可抑制TGF-β1誘導的腹膜間皮細胞EMT。另外，miR-129-5p還可抑制SIP1和SOX4的3’-UTR活性，提示miRNA-129-5p通過轉錄後抑制下游因子SIP1和SOX4調節TGF-β1誘導的HPMCs轉分化（Lab Inv,revised;中華腎臟病雜誌，revised ）。體內研究發現：慢病毒介導的miRNA-129-5p可減輕PD小鼠腹膜纖維化；並抑制HPMCs細胞EMT和SIP1表達。因此，我們提出“腹透液MicroRNAs 可作為診斷PD腹膜纖維化的生物標記物”（Med Hypo, 2012*）及“尿miRNAs是診斷早期DN的生物標記物”（Med Hypo,2013*）。另外，發現Wnt/β-catenin與EMT和纖維化關係密切（BioMed Research International，2013*；Physiol. Res,2012 *）。同時，還闡明“PI3K/Akt通過USP4和smurf2調節TGF-β1誘導的HPMCs細胞EMT（中華腎臟病雜誌，2014 *；BMC Cell Biology， revised）。本項目探討了PD腹膜纖維化分子機制，初步揭示了miR-129-5p在PD腹膜間皮EMT中的作用與機理，將為PD腹膜纖維化提供新的理論依據，並為其防治提供新的靶分子。在項目資助下，尚探討了“糖尿病腎病小管損傷”研究，論文發表在Diabetes（IF8.45）等雜誌。 *上述發表的五篇論文均註明有本項目資助
