microRNA在缺血再灌注致急性腎損傷中的作用及機制研究

《microRNA在缺血再灌注致急性腎損傷中的作用及機制研究》是依託上海交通大學，由張文擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：microRNA在缺血再灌注致急性腎損傷中的作用及機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：張文
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

缺血再灌注致急性腎損傷（AKI）是一個涉及到免疫炎症反應的病理過程，並可根據病程的變化分為始動、發展、修復階段。我們前期通過對microRNA晶片分析認為在AKI進程中有一組microRNA參與各階段並發揮作用。因此本項目擬用microRNA顯著性水平及炎症程度階段相關與否，篩查參與AKI病程的microRNA。採用mimic/inhibitor基因轉染技術對其表達進行干預，觀察炎症程度、細胞表型、動物預後等損傷及修復相關指標變化，確定何種階段相關的microRNA可能成為潛在的治療靶標。通過mRNA顯著性、Luciferase技術、Pathway analysis等技術鑑定microRNA的靶基因並分析相關信號通路，進一步探究缺血性AKI的病理機制，為其防治提供新的策略。

結題摘要

本研究首先成功構建缺血-再灌注和順鉑致急性腎損傷兩種大鼠動物模型。再利用成功構建動物模型，收集大鼠不同時間點尿液、腎皮質標本，分別對尿液和腎皮質進行miRNA的高通量分析，隨後進行定量PCR驗證晶片結果的可靠性。在尿液和腎臟標本中分析出差異表達的miRNA。同時在心臟外科手術術後並發AKI患者尿液中篩選出差異表達的miRNA，如microRNA-30c-5p、microRNA-192-5p。在體外利用腎小管上皮細胞構建低氧－復氧細胞模型，採用mimics和inhibitor轉染，外源性調節microRNA－30c－5p的表達，觀察該miRNA在低氧－復氧所致的凋亡過程中的功能及作用。結果顯示，上調microRNA－30c－5p的表達後，細胞凋亡水平顯著降低，同時可以穩定低氧誘導因子－1a（HIF－1a）的表達。進一步的實驗證實，該miRNA通過作用於靶基因SOCS3，減輕其對HIF1a的抑制作用，進而對腎臟缺血再灌注起保護作用。