《microRNA-217/Wnt5a介導多巴胺D2受體對腎臟纖維化的保護機制研究》是依託浙江大學，由韓飛擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：microRNA-217/Wnt5a介導多巴胺D2受體對腎臟纖維化的保護機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：韓飛
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腎內多巴胺系統對維持正常腎功能與血壓起重要作用，近期發現多巴胺D2受體(D2R)缺失可激活TGFβ1，導致腎纖維化，但作用通路未明。D2R編碼基因的單核苷酸多態性(SNPs)在人群中高發，可導致D2R表達與功能下調，攜帶該SNPs位點者可能成為慢性腎衰竭的易感人群。課題組已在攜帶D2R SNPs位點的人近端腎小管細胞中發現miR-217可介導D2R對腎纖維化的抑制作用，且可能通過下調Wnt5a/Ror2通路而抑制TGFβ1表達。本研究進一步從基因結構與功能角度驗證Wnt5a為miR-217靶基因；並通過miRNA sponge、超聲微泡介導腎臟定向轉染等技術，研究下調miR-217的致腎纖維化作用；上調miR-217逆轉D2R敲除小鼠腎纖維化的作用，及對糖尿病腎病、單側梗阻性腎病模型的治療意義。本研究可明確miR-217/Wnt5a對腎纖維化的作用及機制，有助於開發慢性腎臟病防治的新靶點。
結題摘要
腎臟纖維化是各種腎臟疾病慢性、進行性發展的共同通路，直接導致慢性腎衰竭，尚缺乏有效的預測和治療辦法。本課題在體外實驗中，發現人腎小管上皮細胞中D2R抑制TGFβ1信號傳導通路，從而抑制該細胞向纖維化表型轉化；並且證明其作用通過miR-217下調Wnt5a/Ror2信號通路的活化而介導，同時D2R還可通過Wnt/β-catenin途徑干預腎小管上皮細胞凋亡與增殖；但是在動物模型體內實驗中，敲除D2R模型未出現明顯的腎纖維化表現，而過表達miR-217對糖尿病腎病模型、單側梗阻性腎病(UUO)模型的腎臟病變進展均未發現明顯效果，其原因可能與體內相關通路被抑制後，其它補償機制的激活有關。因此，我們對實驗方案進行了調整，在I/R誘導急性腎損傷後發生腎纖維化（AC模型）小鼠中重新採用RNA-seq進行miRNA篩選，發現miR-874-3p表達下降，而將其過表達可明顯減輕AC模型和UUO模型纖維化；並證實ADAM19是miR-874-3p的結合靶蛋白，在正常小鼠中過表達ADAM19可導致明顯的腎臟炎症與纖維化；下游機制上，miR-874-3p/ADAM19信號通路可以通過增強腎小管上皮細胞損傷和巨噬細胞浸潤調控腎臟纖維化；並在不同病情嚴重程度分期的IgA腎病患者中證實miR-874、Adam19表達水平具有顯著的鑑別價值。由此，我們發現miR-874-3p/ADAM19可能具有較好的臨床套用前景，對於預測腎病進展可能具有一定的價值。在機制研究的同時，我們也進行了IgA腎病、狼瘡性腎炎、ANCA相關性小血管炎腎損害等腎臟炎性進展性疾病的患者資料與標本庫建設，進行了相關特徵分析與總結，為臨床標誌物的篩選提供了病例基礎。
