《Tisp40在腎缺血再灌注損傷中的作用及機制研究》是依託武漢大學，由張傑擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Tisp40在腎缺血再灌注損傷中的作用及機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張傑
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腎缺血再灌注（I/R）所致的腎小管損傷和異常修復伴隨的間質纖維化貫穿於急、慢性腎損傷的全過程，但機制尚未完全闡明。Tisp40屬於CREB/CREM家族轉錄因子，與細胞穩態和炎症相關。我們最近研究首次發現，敲除Tisp40可以減輕I/R所致的小鼠腎小管損傷和腎功能惡化。本項目擬從細胞、動物和分子水平闡明Tisp40在I/R所致的腎小管損傷和異常修復中的雙重作用和機制：（1）通過缺氧和TGFβ1刺激Tisp40基因缺失或過表達的腎小管原代細胞，研究Tisp40在腎小管損傷和修復中的作用和機制；（2）通過在Tisp40基因敲除和腎小管特異性轉基因小鼠建立腎I/R模型，進一步從體內研究Tisp40在腎小管壞死和異常修復所致間質纖維化中的作用和機制；（3）擬通過藥物或基因工程手段抑制或激活Tisp40下游關鍵分子以期逆轉Tisp40敲除和轉基因所致的表型；為急、慢性腎臟疾病的防治策略提出新思路.
結題摘要
腎缺血再灌注損傷是導致急性腎損傷的常見原因，但目前尚無有效的治療方法。Tisp40是CREB/ATF家族的轉錄因子，以往研究發現，Tisp40參與細胞凋亡、增殖和分化。本實驗我們研究Tisp40在腎缺血再灌注損傷中的作用及分子機制。我們選用Tisp40基因敲除小鼠和野生型小鼠為研究對象，通過夾閉雙側腎蒂30分鐘，然後釋放動脈夾再灌注48小時和10周，分別建立腎缺血再灌注損傷和腎纖維化模型。細胞水平我們通過缺氧/復氧和TGFβ1刺激，分別建立腎缺血再灌注損傷和腎纖維化的體外模型。體內實驗研究發現，Tisp40基因敲除可以降低腎缺血再灌注誘導的腎功能下降，抑制腎小管上皮細胞凋亡蛋白（CHOP、Bax、Cleaved Caspase-3）的表達；Tisp40基因敲除可以降低腎缺血再灌注後中性粒細胞和巨噬細胞浸潤、炎性細胞因子（TNF-α、MCP-1）的表達和NF-κB信號通路活化；Tisp40基因敲除可減輕腎缺血再灌注損傷後腎纖維化相關蛋白（α-平滑肌肌動蛋白、纖連蛋白和Ⅰ型膠原蛋白）的表達，並抑制TGFβ/Smads信號通路。體內研究發現，Tisp40基因過表達促進缺氧/復氧誘導的細胞凋亡蛋白（CHOP、Bax、Cleaved Caspase-3）的表達；Tisp40基因過表達促進TGFβ1誘導的腎纖維化相關蛋白（α-平滑肌肌動蛋白、纖連蛋白和Ⅰ型膠原蛋白）的表達，並活化TGFβ/Smads信號通路。總之，Tisp40可加劇腎缺血再灌注損傷誘導的腎小管上皮細胞凋亡、炎症反應和腎小管間質纖維化，而Tisp40基因敲除可減輕缺血再灌注誘導的急性和慢性腎損傷。
