《miR-92a在DCD供腎缺血/再灌注損傷中的作用及機制研究》是依託四川大學，由宋塗潤擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-92a在DCD供腎缺血/再灌注損傷中的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：宋塗潤
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
缺血/再灌注損傷在細胞事件層面分為缺血損傷及再灌注損傷，均與細胞凋亡密切相關。較長時間熱缺血及冷缺血會損傷心死亡(DCD)供腎，移植後再灌注進一步加重損傷，影響移植效果。miR-92a能夠抑制多條凋亡通路的激活。在前期研究中，我們發現腎臟缺血/再灌注損傷後miR-92a明顯增高，並證實其過表達能減少腎臟缺血/再灌注損傷。我們推測miR-92a過表達能夠減少DCD供腎缺血/再灌注損傷。為證實這一假說，我們將收集DCD供腎組織及活體供腎組織，觀察miR-92a的表達與缺血損傷及再灌注損傷的關係；再通過細胞模型及DCD供腎動物模型，觀察干預miR-92a的表達對於DCD供腎缺血損傷及再灌注損傷的影響，並明確其信號傳導通路；最後觀察不同時機干預miR-92a的表達對於DCD供腎質量及移植後效果的影響。本課題將從新的視角闡明DCD供腎缺血/再灌注損傷發生的分子機制，並為改善DCD供腎質量提供新思路。
結題摘要
缺血/再灌注損傷在細胞事件層面分為缺血損傷與再灌注損傷，與細胞凋亡密切相關。較長時間熱缺血及冷缺血會損傷心死亡(DCD)供腎，移植後再灌注進一步加重損傷，影響移植效果。在前期研究中，我們發現腎臟缺血/再灌注損傷(IRI)後miR-92a明顯增高，並證實其過表達能減少腎臟缺血/再灌注損傷。採用動物及細胞模型均發現熱缺血可以誘導自噬體形成；熱缺血後冷保存及IRI明顯增加自噬體數量，提示自噬水平明顯增加；缺血後冷保存會明顯降低miR-92a的表達，且隨著時間延長，表達持續下降；而短時間再灌注會明顯誘導miR-92a的表達，隨著再灌注時間延長，miR-92a的表達持續下降。體外IRI模型也發現隨著再富氧時間延長，miR-92a的表達持續下降。後續採用採用體外模擬IRI，我們發現miR-92a agomir 能夠明顯減少缺氧及缺氧再富氧所誘導的HK-2細胞凋亡，而miR-92a antagomir能夠明顯觸及缺氧及缺氧再富氧所誘導的細胞凋亡。採用自噬促進劑雷帕黴素(Rapa)能夠明顯促進缺氧再富氧所誘導的凋亡，miR-92a能夠拮抗Rapa的促凋亡作用。進一步我們還發現miR-92a agomir能夠明顯抑制缺氧及缺氧再富氧所誘導的自噬水平升高，也能夠拮抗rapa所誘導的自噬水平增加。進一步我們發現miR-92a是通過MEK/JKN通路抑制HK-2細胞缺氧再富氧條件下的自噬水平，從而抑制凋亡。這些結果證過表達miR-92a，可以改善腎臟保存質量及減少缺血再灌注損傷。
