《miR-21在缺血/缺氧耐受誘導的腎臟微循環中作用的研究》是依託復旦大學，由徐夏蓮擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-21在缺血/缺氧耐受誘導的腎臟微循環中作用的研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：徐夏蓮
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
急性腎損傷是一種常見的臨床危重病症，缺血/缺氧腎損傷是急性腎損傷的主要發病原因，缺血/缺氧耐受或缺血預適應是迄今為止發現的最強有力預防缺血性器官損傷的內源性措施。最新研究發現預處理能通過誘導某些miRNAs如miR-21等表達的變化產生臟器的保護作用，miR-21是具有多種功能的重要miRNA，項目組前期工作發現晚期缺血預適應誘導腎臟miR-21高表達，並且miR-21參與腎臟晚期缺血預適應的保護作用，本研究擬在前期工作的基礎上進一步探討腎臟缺血/缺氧耐受中血管內皮細胞miR-21在內皮細胞凋亡、血管新生以及血管舒張三方面的作用，為研究急性腎損傷的修復機制及治療策略提供新的思路與理論依據，並且miR-21將來可能是腎臟I/R損傷的一個非常有效的新靶點之一。
結題摘要
缺血缺血/缺氧腎損傷是急性腎損傷的主要發病原因，缺血/缺氧耐受或缺血預適應是迄今為止發現的最強有力預防缺血性器官損傷的內源性措施。我們前期研究發現缺血預處理能通過誘導miR-21，保護腎臟減輕I/R損傷。然而到目前為止對血管內皮細胞在腎臟缺血性損傷及缺血/缺氧耐受中的作用研究甚少。本研究擬在前期工作基礎上進一步探討血管內皮細胞miR-21在腎臟缺血/缺氧耐受中作用及機制。我們依照研究計畫，我們首先建立了經典的體外細胞缺氧（1%O2物理低氧和CoCl2化學低氧模型）、晚期缺血預適應和氯化鈷預處理構建腎臟缺血缺氧耐受模型小鼠模型，觀察急性缺血/缺氧條件下，HUVEC細胞和小鼠腎組織及管周內皮細胞中miR-21的表達變化，在此基礎上進行一系列的後續研究。我們分別研究miR-21在腎臟缺血/缺氧耐受中血管內皮細胞的抗凋亡、促血管新生和調控血管舒張的作用。我們在實驗中發現缺氧（體外）和腎臟預缺血（體內）同樣誘導血管內皮細胞miR-21高表達。一方面，我們通過體外（細胞低氧模型）和體內（腎臟晚期缺血預適應模型）研究中證實miR-21通過抑制PDCD4，減少血管內皮細胞凋亡，減輕腎臟缺血/再灌注損傷。另一方面，通過生物信息學發現，我們尋找到重要的抗血管新生因子血小板反應蛋白(thrombospondin-1，TSP-1)為預測的miR-21靶基因，並通過螢光素酶報告基因檢測，證實miR-21與TSP-1 3’UTR結合，並在體外低氧培養的內皮細胞中證實miR-21對TSP-1的抑制作用，進一步在氯化鈷誘導的腎臟缺血/缺氧模型中，氯化鈷明顯上調腎臟HIF-1α和miR-21表達，並抑制TSP-1表達。利用LNA anti miR-21抑制氯化鈷誘導的miR-21，證實miR-21通過抑制TSP-1，增加再次缺血/再灌注後腎臟血管新生，減輕腎臟損傷。明確HIF不僅通過VEGF而且可能通過miR-21/TSP-1途徑，調節血管新生。最後。我們在體外內皮細胞研究中，發現誘導miR-21可通過抑制PTEN, 上調pAKT和eNOS表達；抑制miR-21或抑制AKT活化，則eNOS表達下降，該實驗提示miR-21可能通過PTEN/PI3K/AKT通路間接調控eNOS。本項目的研究成果為研究急性腎損傷的修復機制及治療策略提供新的思路與理論依據，並且為今後miRNAs在腎臟疾病中作用的研究提供思
