《缺氧相關miRNA在急性缺血/缺氧腎損傷發病中的作用研究》是依託復旦大學，由丁小強擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：缺氧相關miRNA在急性缺血/缺氧腎損傷發病中的作用研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：丁小強
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
缺血性腎損傷是急性腎損傷的發病機制，也是慢性腎臟病變進展的重要共同機制。MicroRNAs（miRNAs）是一種新的基因表達調控因子，屬於內源性的高度保守、非編碼的微小分子 RNA，對細胞幾乎所有重要的基本生命活動過程包括生長、發育、細胞表型改變等都發揮著重要的調節作用，缺氧相關miRNAs（HRMs）則是調節機體對缺血/缺氧反應的一組重要miRNAs，是缺氧誘導因子（HIF）調控基因的重要環節。但HRMs在腎臟缺血缺氧損傷發病中作用機制目前還未見報導。本項目在原有研究的基礎上進一步將研究焦點集中在急性腎臟缺血/缺氧損傷中HRMs的作用，通過體外細胞實驗和體內動物模型研究，觀察候選HRMs對腎臟缺血/缺氧損傷的影響，明確HRMs調控的下游基因及HIF對其的調控作用，從而為闡明缺血性腎損傷的關鍵發病機制，尋找有效的防治手段奠定基礎。
結題摘要
缺血性腎損傷是急性腎損傷的發病機制，也是慢性腎臟病變進展的重要共同機制。缺氧相關miRNAs（HRMs）則是調節機體對缺血/缺氧反應的一組重要miRNAs，是缺氧誘導因子（HIF）調控基因的重要環節。但HRMs在腎臟缺血缺氧損傷發病中作用機制目前還未見報導。本項目在原有研究的基礎上進一步將研究焦點集中在急性腎臟缺血/缺氧損傷中HRMs的作用。我們依照研究計畫，首先建立了經典的體外細胞缺氧（CoCl2化學缺氧模型）、體內急性缺血性腎損傷模型以及腎臟晚期缺血預適應的小鼠模型，觀察並驗證急性缺血/缺氧條件下，HK-2細胞（體外研究）和小鼠腎組織（體內研究）中篩選出的HRMs如miR-21和miR-29c的表達變化，在此基礎上進行一系列的後續研究。我們首先分別研究miR-21/29c在腎臟急性缺血性腎損傷中的重要作用。我們在細胞實驗中發現miR-21/29c參與細胞保護作用；體內研究中我們證實miR-21在小鼠晚期缺血預適應腎臟保護中的重要作用，通過LNA anti-miR-21抑制缺血預適應誘導的miR-21表達，加重缺血再灌注後腎功能減退和病理損傷，增加靶基因PDCD4表達以及腎小管上皮細胞凋亡，削弱預缺血的腎臟保護作用。然後通過體內外研究，驗證這兩種HRMs（miR-21和miR-29c）所對應的缺氧相關功能的靶基因，並且觀察HIF對兩者的調控作用。我們通過晚期缺血預適應和Xe預處理兩種方式誘導HIF-1α高表達，結果發現HIF-1α高表達具有保護腎臟減輕腎臟缺血/再灌注損傷，並且上調腎組織的miR-21的表達，同時減少miR-21靶基因PDCD4和（或）PTEN的表達；在細胞實驗中，我們在通過HIF decoy ODN證實HIF在缺氧情況下調節miR-21的上調起著重要作用。同時我們通過L-Min激活HIF-1α，伴有miR-29c的表達增加，進一步我們驗證其靶基因TPM1和COL2A1。本項目的研究成果通過尋找腎臟缺血/缺氧損傷反應中關鍵的miRNAs並驗證其功能，不但對闡明腎臟缺血/缺氧的損傷機制和腎臟缺血預適應的保護機制具有十分重要的理論意義，更可能為開發新的藥物或手段模擬預適應保護作用、防治缺血性腎損傷提供依據， 具有潛在的臨床套用價值。對照研究計畫，基本完成了研究任務。
