腎缺血後血管新生的信號調控機制

《腎缺血後血管新生的信號調控機制》是依託南昌大學，由崔蘇萍擔任項目負責人的地區科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：腎缺血後血管新生的信號調控機制
• 項目類別：地區科學基金項目
• 項目負責人：崔蘇萍
• 依託單位：南昌大學

項目摘要

腎臟是最易受缺血影響的器官，儘快恢復缺血腎組織的血供是防治腎功能損傷的關鍵。現有工作及我們的前期研究表明,缺氧/ HIF-VEGF-Notch通路在調控腎缺血後血管新生中可能發揮重要作用,但其具體調控機制尚有待闡明。近來研究發現microRNA(miRNA)對血管新生具有強大的基因調控作用,有研究表明microRNA 126、microRNA 210等缺氧誘導miRNA可靶向VEGF，調控血管新生,分析其極有可能通過影響缺氧/ HIF-VEGF-Notch信號通路參與腎缺血後血管新生的調控。本項目擬採用缺血再灌注腎損傷小鼠模型和血管內皮細胞體外缺氧模型，利用重組慢病毒載體等技術上調或下調特異缺氧誘導miRNA，探討缺氧誘導miRNA如何影響缺氧/ HIF-VEGF-Notch通路來調控血管新生過程，以進一步揭示腎缺血後血管新生的信號調控機制,為治療性血管新生選擇新的治療靶點提供理論依據。

結題摘要

血管新生是缺血後一系列重要生理反應，是指從內皮細胞及健存的血管長出新的微血管的過程。腎缺血後血管新生的精確保護機制尚未闡明。VEGF信號是腎血管新生重要刺激因子，但Notch和腎血管新生的關係尚不清楚。近年報導，miRNA在缺血後血管新生中起到重要作用，但腎缺血後，miRNA能否調控腎臟血管新生及其調控機制尚不清楚。為此，我們採用基因晶片技術建立Balb/c小鼠缺血腎組織miRNA的表達譜，篩選出差異表達的與血管生成相關miRNA。隨後探討了腎缺血後血管新生的分子機制。我們首先建立了Balb/c小鼠急性腎缺血損傷模型，通過腎功能指標及病理證實模型成功。免疫組織化學染色檢測缺血腎組織CD31表達發現腎缺血區毛細血管密度增加。為確定miRNA的改變是否和腎缺血密切相關，我們通過建立缺血腎組織miRNA表達譜，發現了與腎缺血後血管新生相關的miRNAs：76個miRNAs 出現兩倍以上的表達變化，有40個miRNAs表達下調，36個miRNAs 表達上調。其中miR-210、miR-320、miR-126等與血管新生密切相關。我們同時體外建立人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）缺氧模型，發現HUVEC缺氧後VEGF、VEGFR2、Notch-1、HIF-1的基因和蛋白的表達均上調。進一步提示缺氧後，缺氧相關miRNA可參與HIF-VEGF-Notch信號途徑。為明確miR-210是否通過調控VEGF-Notch信號通路涉入腎缺血後血管新生過程，我們通過構建miR-210重組慢病毒載體，並轉染HUVEC使其過表達miR-210，發現HUVEC過表達miR-210後VEGF、VEGFR2、Notch-1 mRNA和蛋白表達均上調，血管內皮細胞形成新生血管的能力增強。表明miR-210可通過調控HUVEC中VEGF-Notch信號通路促進血管新生。我們的研究表明，miRNA可通過調控HIF-VEGF-notch信號通路來調控腎缺血後新生血管形成。缺血相關的特異性miRNA作為腎缺血後重要的調節因子，為探討腎缺血後血管新生機制提供新的思路。