《MicroRNA-296-5p通過CDX1調控胃黏膜上皮腸化生的機制研究》是依託西安交通大學，由郭漢青擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MicroRNA-296-5p通過CDX1調控胃黏膜上皮腸化生的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：郭漢青
- 依託單位：西安交通大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
胃黏膜腸化生是胃癌最重要的癌前病變，其發生機制尚不清楚。CDX1表達異常增高被認為與腸化生密切相關。我們前期研究發現腸上皮化生的組織中CDX1表達明顯升高，並證明miR-296-5p在胃癌中通過靶向CDX1調控其表達。而腸化生的過程中miR-296-5p/CDX1通路發揮的調控作用尚無報導。本項目擬通過免疫印跡、PCR等方法在腸化生細胞模型中驗證miR-296-5p和CDX1的表型；通過慢病毒載體、siRNA技術和掃描電鏡等技術研究miR-296-5p調控腸化生的功能及CDX1對其功能的介導作用；利用免疫共沉澱、截斷報告基因實驗和免疫印跡等實驗明確CDX1下游相關基因；並最終在臨床腸化生組織標本中驗證miR-296-5p和CDX1及其下游基因的相關關係。本項目旨在探索胃癌重要癌前病變-腸上皮化生過程中的分子調控機制，以期初步闡明miR-296-5p/CDX1通路在胃黏膜上皮腸化生中的作用。
結題摘要
研究背景：胃癌是我國發病率最高的消化系統惡性腫瘤，研究癌前病變的發生及轉歸機制至關重要。胃黏膜的腸上皮化生是胃癌最常見的癌前病變，發生腸化生後癌變幾率明顯增高，但其發生機制不清，因此闡釋腸上皮化生及時採取干預措施，將胃癌的惡性表型遏制在癌前階段，是降低腫瘤發生率和致死率最重要的途徑。 研究內容及結果：①驗證了包括miR-296在內的多個miRNA與CDX1及其他靶分子在腸化生組織和細胞中的表型。課題組在前期實驗結果基礎上,建立了膽汁酸誘導胃細胞發生腸化生的細胞模型,通過microRNA微晶片檢測和篩選，發現膽汁酸能夠誘導miR-296-3p和miR-296-5p的表達升高。並進一步驗證了相關分子在腸化生組織中的表型。 ② 研究了包括miR-296在內的多個miRNA對調控腸化生的功能。構建miR-296-3p/5p的功能獲得/缺失細胞模型，進而驗證CDX1和其他靶分子及其下游的腸標誌物分子的表達，從而在體外驗證miR-296-5p調控腸化生的功能；收集臨床腸化生標本在體內驗證相關miRNA及其靶基因調控腸化生的功能。 ③探索了靶基因介導包括miR-296在內的多個miRNA對腸化生的調控功能。明確胃細胞腸化生中miR-296-5p/CDX1通路存在的基礎上，進一步研究CDX1及其他分子下游調控機制。 ④驗證了臨床標本中miRNA及其靶分子的表達。收集臨床標本收集，簽署知情同意書。胃鏡下選取正常胃組織及腸化生組織。，提取組織RNA及蛋白質，分別通過Real-time PCR、western blot和免疫螢光技術，檢測標本上述分子表達變化。研究意義：本項目聚焦胃癌最重要的癌前病變—胃黏膜腸上皮化生，探索了胃細胞腸化生發生的分子機制，通過基因晶片技術和生物信息學分析手段建立了腸化生調控的miRNA-靶分子調控網路，篩選了關鍵的miRNA分子及關鍵靶分子，並通過多種方法探尋包括CDX1在內的多個靶分子在腸化生病理變化中受多個miRNA靶向調控的分子機理，深入研究CDX1等靶分子轉錄調控下游基因的內在機制。本項目本項目旨在探討腸上皮化生發生的原因與機制，重點研究miRNA-靶基因調控網路導致胃上皮細胞腸化生的分子機制，為胃癌癌前病變的早期干預和胃癌防治提供了新的思路。
