《CDX2在膽汁酸誘導胃上皮細胞腸化生中的分子機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由時永全擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：CDX2在膽汁酸誘導胃上皮細胞腸化生中的分子機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：時永全
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
胃黏膜腸上皮化生是胃癌最重要的癌前病變。膽汁酸是導致胃上皮細胞腸化生的重要原因，但機制尚不清楚。轉錄懂洪料應因子CDX2是腸上皮發育分化中的關鍵分子，其在胃上皮細胞中匙虹拳異常表達可能是腸化生起始的關鍵步驟。申請者通過建立膽汁酸誘導胃上皮細胞腸化模型，證實膽汁酸刺激可導致胃上皮細胞CDX2激活，且早於其他腸上皮特異分子標誌表達。我們由此推櫃墊盛測：膽汁酸通過誘導胃上皮細胞CDX2活化，引起一系列分子事件，最終導致腸上皮化生。本項目擬通過轉錄汗捉棕煉因子結合位點分析、啟動子報告基因等實驗研究膽汁酸-CDX2信號轉導途徑；利用構建慢病毒載體、RNA干擾等方法確定CDX2在膽汁酸誘導腸化生中的作用；聯用ChIP-on-chip和表達譜晶片篩選CDX2下游靶基因並驗證其功能，以期初步闡明膽汁酸活化CDX2誘導胃黏膜細胞腸悼鴉照化生的分子機制，深化對癌前病變的認識，為理解胃癌發生並制定早期干預對策提供理論和實驗支持。
結題摘要
膽汁酸促進胃黏膜腸化生的機制未明。基於前期工作和文獻回顧，我們推測，膽汁酸可能通過其受體FXR或者非受體依賴途徑激活CDX2的表達，最終促進胃黏膜腸化生的殼遙擔發生髮展。 本項目主要研究結果：第鑽符一，建立了膽汁酸誘導胃黏膜腸化生的細胞模型。使用多種膽汁酸刺激胃上皮細胞株，可誘導多種腸標誌分子的表達，使胃上皮細胞出現腸表型。第二，證實了腸道特異性轉錄因子CDX2在胃上皮細胞腸化生中的作用。發現膽汁酸可以誘導CDX2在胃上皮細胞中的表達，通過基因轉染在胃上皮細胞中過表達CDX2可以誘導腸表型，而干擾CDX2的表達可以阻斷膽汁酸誘導腸表型的作用。第三，明確了FXR/SHP/NF-kB介導膽汁酸對CDX2和腸化生的誘導作用。在胃上皮細胞中敲低膽汁酸受體FXR的表達水平或者使用FXR拮抗劑均可抵消膽汁酸對CDX2的表達誘導作用，而FXR激動劑可以誘導CDX2的表達，FXR和CDX2在胃黏膜腸化生組織中均表達增強並呈正相關。進一步發現，FXR作為轉錄因子直接啟動SHP的表達，而SHP可以促進NF-kB的活性，SHP增強CDX2的表達，而NF-kB抑制劑可以阻斷這一效應。第四，明確了miR-92a/FOXD1/ NF-kB介導膽汁酸對CDX2和腸化生的誘導作用。膽汁酸可以促進胃上皮細胞表達miR-92a，過表達miR-92a可促進CDX2及其下游腸型標誌分子的表達，而抑制miR-92a的表達則相反。進一步發現，miR-92a靶向抑制FOXD1的表達，而FOXD1抑制NF-kB活性，NF-kB抑制劑可阻斷miR-92a對CDX2的上調作用。第五，發現了MicroRNA-7/NF-kB和cyclophilin B/STAT3/microRNA-520d-5p兩個反饋環路參與幽門螺桿菌對胃黏膜的損傷與致癌作用，提示幽門螺桿菌和膽汁酸下游存在互作，共同促進胃黏膜病變進展。第六，發現了miR-17-92外周血水平對腸化生的診斷和鑑別診斷價值。上述結果為闡明胃黏膜腸化生的分子機制和尋找治療靶點提供了理論依據。 課題組共發表學術論文13篇，其中SCI論文7篇。培養博士研究生1名、碩士研究生5名。課題負責人2015年入選國家中青年科技創新領軍人才，2016年入選國家萬人計畫。
