《miR-338-3p/155-5p在根尖周炎破骨細胞分化中的作用》是依託華中科技大學，由孫琴擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-338-3p/155-5p在根尖周炎破骨細胞分化中的作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：孫琴
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
MicroRNA是一類長度約為20-24nt的單鏈非編碼小分子RNA，在生物體生理病理過程的各個方面發揮了重要作用。本項目旨在探討miR-338-3p/155-5p在根尖周炎破骨細胞分化過程中的作用。首先，利用real-time PCR和northern blot技術檢測miR-338-3p/155-5p在破骨細胞分化中的表達趨勢；利用mimics及inhibitors過表達和抑制microRNAs後檢測破骨細胞分化相關基因的表達；再利用生物信息學方法和雙螢光素酶報告實驗確認miR-338-3p/155-5p與靶基因MafB之間的結合關係；進一步利用體內實驗證實microRNAs在破骨細胞分化中的作用；最後，共轉染microRNAs及靶基因抑制劑，探討miR-338-3p/155-5p調控破骨細胞分化的機制。
結題摘要
破骨細胞分化受到細胞因子、信號通路、表觀遺傳等多方面因素的調控。microRNA是一類長度約為20-24nt的非編碼小分子RNA。前期研究表明，破骨細胞分化受到作為表觀遺傳調控因子之一的micro RNA的調控。本項目中，首先利用RAW264.7破骨細胞系建立細胞分化體外模型，利用TRAP染色和real-time PCR技術檢測相關基因的表達；再通過過表達和抑制microRNA的方法驗證microRNA在破骨細胞分化中的功能；利用生物信息學方法預測靶基因；最後將microRNA和靶基因共表達確認其對破骨細胞分化的影響。研究結果發現miR-338-3p在破骨細胞分化過程中逐步上調，過表達/抑制miR-338-3p分別促進和抑制破骨細胞分化，生物信息學研究提示MAFB基因是miR-338-3p的靶基因之一，過表達MAFB抑制破骨細胞分化，而抑制MAFB促進破骨細胞分化，同時抑制MAFB和過表達miR-338-3p對破骨細胞分化無影響。此外，miR-155-5p在破骨細胞分化過程中逐步下調，抑制miR-155-5p促進破骨細胞分化，而敲除miR-155-5p促進破骨細胞分化，BACH1為miR-155-5p的靶基因。以此證明miR-338-3p/155-5p分別通過作用於MAFB/BACH1基因調控破骨細胞分化，從而為骨質疏鬆症等與骨代謝相關疾病的治療提供一定的理論依據。
