USP25基因在非小細胞肺癌轉移中的作用及其分子機制研究

《USP25基因在非小細胞肺癌轉移中的作用及其分子機制研究》是依託上海交通大學，由姚明擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：USP25基因在非小細胞肺癌轉移中的作用及其分子機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：姚明
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

非小細胞肺癌（non-small-cell lung cancer, NSCLC）是世界上最常見的惡性腫瘤之一，轉移是非小細胞肺癌患者死亡的主要原因。本課題組前期以自建的肺癌高、低轉移細胞為研究對象，採用Agilent公司人類全基因寡核苷酸晶片技術結合實驗室驗證的實驗方法，提示泛素特異性蛋白酶25（USP25）可能是非小細胞肺癌新的轉移促進基因。本項目擬在分子水平、細胞水平和整體水平深入研究USP25在肺癌轉移過程中的作用，同時採用免疫共沉澱、基因表達譜晶片、蛋白質譜分析等實驗方法，尋找相關的調控蛋白，進一步闡明USP25影響肺癌轉移的分子機制，最終使用大樣本臨床標本進行相關性驗證和分析。通過對USP25在肺癌轉移過程中的功能及作用機制的深入研究，將進一步了解肺癌轉移發生的分子機制，並有可能明確USP25成為肺癌轉移新的預後指標或治療靶點，為臨床肺癌轉移的診斷和治療提供新的思路。

結題摘要

在世界範圍內，肺癌是發病率第二，死亡率第一的惡性腫瘤，其中非小細胞肺癌占在所有的肺癌的75-80%。我們發現文獻報導USP25可通過穩定 TRAF3 的表達在固有免疫中發揮作用，我們在高表達內源性TRAF3的細胞中，用TRAF3抗體進行免疫共沉澱-Western blot 實驗，均可檢測到USP25的表達。在高表達內源性USP25的細胞中，用USP25抗體進行免疫共沉澱-Western blot 實驗，均可檢測到TRAF3的表達。我們在SPC-A-1sci,H1299 細胞中干擾USP25的表達，檢測 TRAF3的表達，干擾USP25後，TRAF3的表達均具有一定程度的降低。在SPC-A-1 細胞中過表達USP25的表達，檢測 TRAF3的表達，過表達USP25後，TRAF3的表達均具有一定程度的增加。TRAF3表達量的改變對USP25並無影響，USP25表達量的改變對TRAF3 mRNA水平沒有改變，因此可推斷USP25對TRAF3的影響是轉錄後修飾。採用 Real-time PCR 方法對人肺癌組織以及相應的癌旁組織（73 對）進行TRAF3 的 mRNA 水平表達檢測，與癌旁組織相比，TRAF3 在肺癌組織中呈廣泛高表達，其表達水平與肺癌患者的臨床分期、轉移等臨床特徵呈正相關性。 另外，我們利用臨床標本建立了一個高轉移動物模型和細胞系，為腫瘤研究提供了理想的研究工具。首次發現了長鏈非編碼RNA MetaLnc9在肺癌轉移過程中的功能及分子機制，是新的非小細胞肺癌潛在的治療靶點。在73對肺癌臨床樣本檢測和對TCGA資料庫464對臨床樣本分析中，發現高表達MetaLnc9與肺癌的TNM分期、肺癌轉移及預後成正相關；在功能實驗上，發現MetaLnc9可以促進肺癌細胞的體外體內遷移和侵襲轉移能力；在分子機制的研究中，MetaLnc9與糖酵解激酶PGK1相互作用並阻止其在肺癌細胞中的泛素化，導致致癌AKT / mTOR信號通路的激活。 MetaLnc9還與P54nrb / NonO（NONO）相互作用，以幫助介導CRTC的活化，CRTC是轉錄因子CREB的共同激活因子，加強了轉移的正反饋環。