《USP22在非小細胞肺癌發生和發展中的作用及分子機制》是依託上海交通大學，由丁芳寶擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：USP22在非小細胞肺癌發生和發展中的作用及分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：丁芳寶
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
非小細胞肺癌的發生髮展機制未完全闡明。我們前期研究發現：USP22在人NSCLC組織和細胞株中呈高表達；USP22基因沉默引起NSCLC細胞凋亡和細胞周期停滯在G0/G1期，並抑制裸鼠體內腫瘤生長；USP22通過與MDMX作用激活p53通路，還能通過去泛素化作用調節COX-2而增強PGE2的表達，發揮促癌作用。結合文獻，我們認為“USP22可能通過去泛素化MDMX/MDM2而參與調控p53和NF-κB通路間的互動作用，促進NSCLC的發展；還可能通過調節miRNA激活下游靶基因，影響NSCLC的發生髮展”。本課題擬在NSCLC 細胞系A549和NCI-H460中，從體內、外兩方面證實USP22在NSCLC細胞生長增殖中的作用；從USP22參與miRNAs和靶基因作用、參與MDMX/MDM2和p53通路以及p53和NF-κB通路間互動作用的調控等方面，闡述其促進NSCLC發生髮展的分子機制。
結題摘要
肺癌（Lung Cancer, LC）是全球範圍內發病率及死亡率最高的惡性腫瘤，其中約80-85%為非小細胞肺癌（Non Small Cell Lung Cancer, NSCLC），並且發病率正逐年增高，嚴重威脅著人類的生命和健康。泛素特異肽酶22（Ubiquitin Specific Protease 22，USP22）是近年來發現的泛素水解酶家族的一個新成員，屬於UBPs家族。USP22參與腫瘤細胞周期相關基因的調控，並與腫瘤細胞增殖密切相關。在前期研究中，我們對非小細胞肺癌腫瘤組織和不同非小細胞肺細胞株中USP22的表達情況進行了測定，發現USP22在非小細胞肺癌組織和細胞中表達明顯上調。隨後我們構建了USP22 RNAi穩定表達非小細胞肺癌細胞株，有效地沉默USP22基因表達，利用MTT法、流式細胞技術和體內成瘤實驗在體外、體內證實了USP22基因沉默可以顯著抑制非小細胞肺癌細胞的增殖。同時，通過免疫沉澱驗證了USP22和MDMX兩者之間的相互作用。通過過表達和沉默MDMX，實驗表明USP22通過上調MDMX，抑制p53及相關通路蛋白發揮促進非小細胞肺癌增殖的作用。隨後證明了miR-30e-5p通過與USP22中的特定序列結合而負向調節USP22的表達，結果表明miR-30e-5p可通過下調USP22，使Sirt1 / JAK / STAT3信號通路失活，從而抑制NSCLC的發生。在後續研究中，我們發現與USP22同家族的USP21在NSCLC的發生髮展過程中也有一定的作用。在NSCLC細胞中，USP21通過去泛素化YY1,使其蛋白水平表達穩定。隨後進一步驗證了YY1可結合至SNHG16的啟動子區域並上調SNHG16的表達水平，同時SNHG16通過調控miR-4500可增強USP21表達水平。這樣USP21/YY1/SNHG16可形成一個反饋迴路調控非小細胞肺癌的增殖、遷移和侵襲。本課題為NSCLC的診斷和治療提供理論依據與實踐基礎。
