《IL-24和IP-10雙基因聯合治療人非小細胞肺癌的作用機理研究》是依託四川大學，由劉磊擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：IL-24和IP-10雙基因聯合治療人非小細胞肺癌的作用機理研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：劉磊
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
肺癌的發生和發展是多基因改變的多階段過程，其分子生物學特性十分複雜。因此針對多個具有不同作用機理、不同信號通路的治療靶點研究設計治療藥物是肺癌治療的重要發展方向。本課題在我們前期研究的基礎上，利用同一質粒同時表達能誘導腫瘤細胞凋亡、抑制新血管生成、激活抗腫瘤免疫的人IL-24 基因和能調節抗腫瘤免疫、抑制新血管生成的人IP-10 基因，對人非小細胞肺癌進行雙基因聯合治療研究。我們擬在人外周血淋巴細胞-SCID鼠上建立肺癌的皮下瘤模型和肺轉移瘤模型，通過尾靜脈注射DNA-脂質體複合物的方式，觀察比較聯合治療的效果；同時通過在體內外開展一系列細胞凋亡、血管生成及免疫學相關實驗，探討IL-24和IP-10雙基因聯合治療肺癌的作用途徑及發揮協同效應的機制。該治療模式預計能同時產生誘導腫瘤細胞凋亡，激活機體特異性抗腫瘤免疫和抑制腫瘤新血管生成三重抗腫瘤效應，為肺癌的多靶點聯合治療提供新的思路。
結題摘要
多項研究提示IL-24基因可能是一重要的抑癌基因，其通過選擇性的誘導腫瘤細胞凋亡、抑制血管生成、調節機體免疫功能等多種途徑發揮抗腫瘤作用。IL-24可以誘導包括肺癌、黑色素瘤、乳腺癌、結腸癌等在內的多種腫瘤細胞凋亡，而對正常組織無明顯毒副作用。同為細胞因子家族成員的CXC趨化因子配體10(CXCL1O、IP 10)，是在外源性和內源性炎性因子刺激下，由成纖維細胞、內皮細胞、淋巴細胞等多種細胞表達分泌的可以趨化淋巴細胞的趨化因子。近年來的研究表明IP-10 具有調節抗腫瘤免疫、抑制新血管生成等多種抗腫瘤功效，在腫瘤生物治療領域展現出了良好的套用前景。目前多項研究表明，針對不同靶點的雙基因或多基因聯合治療惡性腫瘤，各單基因之間表現出了協同作用效應，顯著提高了療效。本課題將IL-24和IP-10兩個在惡性腫瘤治療中具有良好套用前景的基因聯合用於治療人非小細胞肺癌，並探討發揮協同抗腫瘤效應的機理。我們構建了IL-24和IP-10雙基因共表達質粒，在體外MTT增殖試驗和克隆形成試驗中，我們觀察到IL-24/IP-10雙基因聯合治療較各單基因治療可以更明顯抑制腫瘤細胞增殖活性和克隆形成。通過小管生成試驗，發現IL-24/IP-10雙基因聯合治療較各單基因治療可以在體外更明顯的抑制血管生成。接下來我們建立了人非小細胞肺癌皮下移植瘤模型和肺轉移瘤模型，並觀察到IL-24/IP-10雙基因聯合治療較各單基因治療可以更加明顯地抑制皮下移植瘤的生長和抑制腫瘤肺轉移。通過對腫瘤組織的TUNEL螢光染色、CD31及PCNA免疫組化染色，發現IL-24/IP-10雙基因聯合治療較各單基因治療可以在體內更顯著的誘導肺癌細胞凋亡、抑制腫瘤增殖及抑制腫瘤新血管生成。通過進一步對腫瘤組織的Caspase 3、Bcl 2及VEGF等免疫組化染色分析，我們觀察到IL-24/IP-10雙基因聯合治療組的腫瘤組織Caspase 3表達增多更加明顯，而Bcl 2及VEGF的表達則降低更為顯著。提示在體內IL-24/IP-10雙基因聯合治療可能是通過激活內源性途徑發揮協同作用誘導肺癌細胞凋亡的，而VEGF的表達較單基因治療組降低則提示通過聯合抑制腫瘤組織VEGF表達可能是發揮協同作用抑制腫瘤血管生成的機理之一。我們的研究提示IL-24和IP-10雙基因聯合可能為人非小細胞肺癌的治療提供一種新的治療策略。
