miR-361-3p調控SH2B1在非小細胞肺癌侵襲轉移中的作用及機制研究

《miR-361-3p調控SH2B1在非小細胞肺癌侵襲轉移中的作用及機制研究》是依託中南大學，由張春芳擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：miR-361-3p調控SH2B1在非小細胞肺癌侵襲轉移中的作用及機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：張春芳
• 依託單位：中南大學

項目摘要

前期工作證實SH2B1在非小細胞肺癌(NSCLC)侵襲轉移中發揮重要作用，其作用機制不清楚。JAK2及IGF-1R兩信號通路介導SH2B1磷酸化與細胞遷移相關；我們發現miR-361-3p 在NSCLC中表達明顯下調，生物信息學預測SH2B1是miR-361-3p 直接靶基因，過表達miR-361-3p 下調SH2B1 蛋白表達，同時細胞的遷移侵襲能力明顯下降。本項目擬採用基因轉染、定量PCR、報告基因、雞胚絨毛尿囊膜血管形成、動物模型、組織晶片等方法分析證實NSCLC中miR-361-3p表達下調導致SH2B1表達增加，上調JAK2及IGF-1R兩信號傳導通路及相應靶基因表達及活性促細胞遷移、細胞外基質降解及新生血管生成，參與侵襲轉移。項目不僅有助於闡明SH2B1表達上調促進NSCLC 侵襲轉移分子機制，且為預測肺癌轉移復發提供新的生物標誌物和確立肺癌轉移治療新靶點提供充分的科學依據。

結題摘要

研究背景 microRNAs是一類長度約19~24個核苷酸的非編碼的單鏈RNA分子，大量的microRNA被發現和證實在非小細胞肺癌發生髮展過程中起著重要作用。近年來的研究發現miR-361在宮頸癌、前列腺癌、胃癌、結直腸癌、肝癌中參與腫瘤的發生髮展。但miR-361-3p在非小細胞肺癌中的具體調劑機制國內外尚未見報導。 目的 研究miR-361-3p在非小細胞肺癌組織中的表達水平及其臨床病理特徵的關係，證實miR-361-3p對非小細胞肺癌細胞的作用和具體作用機制。 方法 1. PCR技術檢測miR-361-3p在非小細胞肺癌組織及細胞系中的表達情況，分析其與臨床病理特徵的相關性； 2. 干預非小細胞肺癌細胞中miR-361-3p的表達，觀察其對非小細胞肺癌細胞增殖及侵襲遷移能力的影響； 3. 採用螢光素酶報告基因及Western blot、免疫組化方法對miR-361-3p在非小細胞肺癌細胞中預測的靶基因進行驗證，並分析靶蛋白與miR-361-3p的關係； 4. 通過恢復靶基因表達，證實下游靶點及具體作用通路； 結果 1. miR-361-3p的在非小細胞肺癌患者中呈現普遍低表達，其表達水平與非小細胞肺癌患者的TNM分期和淋巴結轉移相關。 2. miR-361-3p抑制體內和體外非小細胞肺癌細胞的生長增殖及侵襲和遷移。 3. SH2B1是miR-361-3p的直接作用靶基因，且SH2B1在非小細胞肺癌中呈高表達，其高表達與淋巴結轉移和TNM分期相關，並與miR-361-3p的表達呈負相關。 4. miR-361-3p上調對體外非小細胞肺癌細胞的抑制生長增殖及侵襲和遷移作用可以被上調靶基因SH2B1所修復。 5. 低表達miR-361-3p失去對靶基因SH2B1的抑制作用，激活JAK2/Rac1信號通路 結論 低表達miR-361-3p與非小細胞肺癌患者高淋巴轉移及TNM分期有關，低表達miR-361-3p失去對SH2B1的抑制作用介導了JAK2/Rac1通路的激活促進非小細胞肺癌的細胞增殖及轉移能力。