《miR128調控MET信號機制及在逆轉非小細胞肺癌EGFR-TKI耐藥中的套用》是依託浙江大學，由周建婭擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR128調控MET信號機制及在逆轉非小細胞肺癌EGFR-TKI耐藥中的套用
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：周建婭
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
套用表皮生長因子酪氨酸激酶抑制劑（EGFR-TKI）治療晚期非小細胞肺癌（NSCLC）存在原發和繼發耐藥是其臨床套用的瓶頸。課題組前期經實時細胞分析發現在MET高表達的EGFR-TKI非敏感細胞株A549轉染miRNA-128（miR128）能明顯提高其對吉非替尼的敏感性。本研究在細胞水平驗證MET是否是miR128的靶基因，明確miR128是否直接作用於MET-3'UTR（非編碼區），降解MET-mRNA，從而抑制MET表達，促進凋亡，抑制轉移，逆轉對EGFR-TKI耐藥。在150例使用EGFR-TKI前的NSCLC標本及其中41例臨床獲益患者用藥前/耐藥後配對標本中，結合臨床資料回顧分析，明確miR128與MET、與EGFR-TKI耐藥及與預後的關聯。該研究將闡明miR128調控MET信號機制，有望從miRNA水平進一步探求EGFR-TKI耐藥機制，找出對抗方法，為克服耐藥提供新靶點。
結題摘要
本研究課題目的是探討某些特定miRNA是否通過調控MET 信號機制而逆轉非小細胞肺癌（NSCLC）對表皮生長因子酪氨酸激酶抑制劑（EGFR-TKI）的繼發耐藥。在進一步針對NSCLC細胞實驗過程中，我們發現miR-34a對MET的下調作用比miR-128更明顯，我們的研究重點調整為miR-34a在其中的作用。MiR-34a作為一種抑癌基因，在NSCLC中呈低表達，我們發現，在NSCLC細胞中miR-34a的過表達可通過靶向作用MET-3‘-非編碼區（UTR），顯著抑制MET的表達。HGF通過激活MET，進而通過旁路途徑激活下游PI3K/Akt和ERK信號通路介導了EGFT-TKIs的繼發耐藥。HGF的過表達是EGFR-TKIs繼發耐藥的重要機制。我們選用PC-9和HCC827兩種EGFR突變NSCLC細胞株，採用CCK-8法、流式凋亡技術、Western Blot法、雙螢光素酶報告方法及體內裸鼠移植瘤等方法，我們發現miR-34a的過表達部分通過有效的抑制MET，進而在體外和體內水平均顯著逆轉EGFR突變NSCLC細胞對Gefitinib的繼發耐藥。該研究從miRNA 水平探討了逆轉EGFR-TKI 耐藥的方法，為克服耐藥提供了新靶點。
