《MiR-34a/AXL介導非小細胞肺癌EGFR-TKI獲得性耐藥的分子機制》是依託南京大學，由王永生擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MiR-34a/AXL介導非小細胞肺癌EGFR-TKI獲得性耐藥的分子機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王永生
- 依託單位：南京大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
表皮生長因子受體抑制劑（EGFR-TKI）已成為EGFR突變型晚期非小細胞肺癌的一線標準治療，但獲得性耐藥卻成為臨床治療上的難題。AXL是編碼受體酪氨酸激酶的基因，其蛋白被證實在多種腫瘤組織中異常表達，並與腫瘤細胞的增殖、凋亡、轉移及耐藥相關。我們前期研究發現在吉非替尼耐藥細胞株中AXL高表達，而miR-34a明顯低表達，生物信息學軟體提示AXL是miR-34a的潛在靶點，因此推測miR-34a可能調控AXL的表達，AXL高表達後通過活化下游信號通路而導致耐藥。本課題擬進一步上調或者下調AXL，觀察肺癌細胞內AXL下游信號通路PI3K/AKT、MEK/ERK及JAT/STAT通路的變化，探討AXL導致獲得性耐藥的機制；並構建載體驗證AXL是miR-34a的下游靶點，明確AXL的調控機制；同時建立動物模型和收集臨床標本進行驗證，為AXL或miR-34a作為逆轉TKI耐藥的治療靶點提供思路。
結題摘要
背景：AXL是編碼受體酪氨酸激酶的基因，並與腫瘤細胞的增殖、凋亡、轉移及耐藥相關。本課題擬上調或者下調AXL，觀察肺癌細胞內AXL下游信號通路的變化，探討AXL導致獲得性耐藥的機制；並構建載體驗證AXL是miR-34a的下游靶點，明確AXL的調控機制；同時建立動物模型和收集臨床標本進行驗證，為AXL或miR-34a作為逆轉TKI耐藥的治療靶點提供思路。 研究內容： （1）細胞及臨床標本中檢測AXL及其配體Gas6的表達 （2）探討AXL導致EGFR突變型NSCLC細胞耐藥的分子機制 （3）探討EGFR突變性肺癌細胞株中AXL的調控 （4）動物體內驗證AXL導致耐藥及其調控 重要結果：（1）在吉非替尼耐藥的細胞株，AXL表達明顯升高（是吉非替尼敏感細胞的3倍以上）；如果在耐藥細胞株中AXL的表達被抑制（siRNA），其下游通路的p-AKT及p-ERK1/2表達明顯減少，且耐藥細胞株部分恢復對吉非替尼敏感；如果在敏感細胞株中過表達AXL，則細胞會產生耐藥；我們還發現AXL和NSCLC的分化和腫瘤大小及預後相關； （2）在吉非替尼耐藥的細胞株中，AXL的表達被抑制後，miRNA表達會發生變化；其中變化最明顯的為miR-374a 和 miR-548b；在NSCLC中miR-374a調控Wnt5a，而miR-548b調控CCNB1；在耐藥細胞株中，miR-374a被下調後會抑制細胞的轉移，而miR-548b則會誘導細胞的周期停止，而miR-374a 和 miR-548b和NSCLC細胞 的EMT及凋亡相關； （3）長鏈RNA FOXF1-AS1在NSCLC組織中低表達，在NSCLC細胞中高表達FOXF1-AS1可以抑制細胞轉移；FOXF1-AS1可以調控NSCLC細胞的EMT和幹細胞特性； 關鍵數據及意義：（1）AXL和NSCLC的預後相關；將來可作為預後因子； （2）AXL可以調控miR-374a 和 miR-548b，進而調控NSCLC的EMT，幹細胞特性，凋亡和TKI耐藥，從而可以作為將來逆轉耐藥及轉移相關的治療靶點
