《PMEPA1促進結直腸癌轉移的分子機制研究》是依託浙江大學，由來翀擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：PMEPA1促進結直腸癌轉移的分子機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：來翀
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腫瘤轉移是導致結直腸癌病患死亡的主要原因。本課題組先期利用雷射捕獲顯微鏡切割技術精確分離結直腸癌前緣單個腫瘤芽細胞、腫瘤細胞和正常黏膜細胞，表達譜晶片篩選差異篩選結果發現前列腺跨膜蛋白PMEPA1在腫瘤芽細胞和腫瘤細胞中表達均明顯上調，且其表達與腫瘤轉移、TMN分期和預後有關，推測PMEPA1在結直腸癌上皮細胞間充質轉化（EMT）和轉移過程中發揮重要作用。在此基礎上我們擬通過構建PMEPA1過表達和shRNA載體模型研究其在調控結直腸癌發生髮展中的作用，採用免疫共沉澱技術結合CRISPR/Cas9技術研究PMEPA1直接相互作用蛋白及關鍵位點，明確PMEPA1在結直腸癌中是否依賴雄激素受體（AR）信號通路調控結直腸癌EMT和轉移，解決PMEPA1在腫瘤中的雙相作用機制等問題。以上機制的闡明可能實現將以PMEPA1的表達和AR活化程度對結直腸癌進行分層進而實現結直腸癌的預防和精準治療。
結題摘要
結直腸癌是目前高發和致死的惡性腫瘤之一，腫瘤轉移是結直腸癌致死的重要原因，但其腫瘤轉移的生物學機制仍不清楚，因此腫瘤一旦轉移臨床上沒有很好的治療措施。前列腺跨膜蛋白基因PMEPA1（prostate transmembrane protein, androgen induced 1）是我們實驗室先前用表達譜晶片篩選發現的在結直腸浸潤前緣腫瘤芽中高表達的基因。基因定位於20q13.3，編碼了一種NEDD4 E3泛素連線蛋白。已有研究發現PMEPA1在多種腫瘤如前列腺癌、腎細胞癌、肺癌、乳腺癌和卵巢癌中異常表達，而且存在PMEPA1在不同腫瘤中表達的功能不一致現象。其表達可能受雄激素、表皮生長因子（EGF）、RAS/ERK、P53突變和TGF-β等多種信號通路調控。然而其在結直腸癌中表達及功能仍不明確。本研究以此為切入點，圍繞PMEPA1在結直腸癌中的功能及其分子機制進行系列研究。我們採用RT-PCR和免疫組化的方法檢測結直腸癌臨床樣本，發現PMEPA1在結直腸癌組織中表達明顯升高，並且高表達的PMEPA1的病人的預後較差。進一步通過體外實驗在PMEPA1高表達的HT29 和SW620細胞系中採用siRNA敲降其表達，結果發現PMEPA1敲降的細胞增殖能力減弱，細胞被阻滯在G1/G2期；並且遷移侵襲能力受到抑制。在HCT116和HCT8細胞系中過表達PMEPA1，發現PMEPA1明顯促進結直腸癌細胞增殖、遷移和侵襲。機制研究表明PMEPA1可以通過激活SMAD2/3非經典TGF-β信號通路進一步促進結直腸癌EMT和轉移，但PMEPA1促進結直腸癌增殖和轉移的功能並不依賴於雄激素受體信號途徑。該課題研究闡明了PMEPA1通過非經典TGF-β信號通路促進結直腸癌細胞的增殖和浸潤，與結直腸癌的轉移和預後相關。這種作用與雄激素受體信號通路無關。PMEPA1可成為診斷和預後候選標誌物及治療靶點有價值進行深入研究和套用開發。
