《HOXB-AS3/HOXB7/PAK4信號軸調控結直腸癌侵襲轉移的分子機制研究》是依託四川大學，由江丹擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：HOXB-AS3/HOXB7/PAK4信號軸調控結直腸癌侵襲轉移的分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：江丹
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
我們前期研究發現lncRNA HOXB-AS3和HOXB7基因在結直腸癌高轉移細胞株及結直腸癌組織中高表達，兩者表達呈正相關，且均與患者不良預後相關。HOXB-AS和HOXB7均可促進結直腸癌細胞的侵襲遷移能力，HOXB-AS3可調控HOXB7的表達及生物學功能。HOXB7可調控PAK4激酶的表達，可激活PI3K/AKT、ERK/MAPK信號通路。本研究擬構建過表達及干擾細胞株模型，用三維培養、可視化結直腸癌原位及轉移動物模型等實驗驗證HOXB-AS3及HOXB7對結直腸癌細胞侵襲遷移能力的影響；用染色質免疫共沉澱、雙螢光素酶基因報告系統等方法分析HOXB-AS3調控HOXB7的分子機制，HOXB7通過PAK4調控PI3K/AKT、ERK/MAPK信號通路的分子機制。揭示HOXB-AS3/HOXB7/PAK4信號軸在結直腸癌侵襲轉移中的分子機制，為結直腸癌轉移的治療和藥物篩選提供新靶點。
結題摘要
結直腸癌是常見的惡性腫瘤。原位雜交檢測結果顯示lncRNA HOXB-AS3在結直腸癌中表達定位於細胞核。實時螢光定量PCR檢測發現lncRNA HOXB-AS3在腫瘤組織中較癌旁組織中表達更低；其在腫瘤組織中低表達與5-氟尿嘧啶治療反應不佳相關；且lncRNA HOXB-AS3的低表達與高T分期，高N分期相關。構建過表達lncRNA HOXB-AS3的SW620和HCT116細胞株。藥敏實驗結果示在含5-氟尿嘧啶生長環境中，過表達組較對照空載組，藥物抑制腫瘤細胞增殖的抑制率增加。流式細胞術檢測結果示過表達組較對照空載組，細胞凋亡率增加；且western blot檢測示促凋亡蛋白Bax和促凋亡活性酶Caspase 3表達均上調。構建干擾lncRNA HOXB-AS3的SW480和LS174T細胞株。藥敏實驗發現干擾組較對照組，藥物抑制腫瘤細胞增殖的抑制率降低。流式細胞術檢測結果示干擾組細胞凋亡率降低；且western blot檢測結果示促凋亡蛋白Bax和促凋亡活性酶Caspase 3表達均下調。Western blot檢測結果示過表達lncRNA HOXB-AS3細胞組NFkB信號通路活性降低， JNK信號通路活性上調；而干擾組則NFkB信號通路活性上調，JNK信號通路活性下調。本研究揭示了lncRNA HOXB-AS3通過調節NFkB和JNK 信號通路活性，誘導凋亡，從而增強結直腸癌細胞對5-FU的敏感性。本課題研究結果為lncRNA HOXB-AS3是結直腸癌治療的重要預測因子及靶點提供了理論基礎。
