《肌動蛋白結合蛋白Transgelin在結直腸癌轉移中的分子機制》是依託中山大學，由林（王瑩）擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：肌動蛋白結合蛋白Transgelin在結直腸癌轉移中的分子機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：林(王瑩）
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
腫瘤轉移是結直腸癌病人死亡的主要原因，因而探索結直腸癌的轉移機制及尋找抗轉移治療新靶點是結直腸癌研究的前沿領域。申請人在前期研究中（Lin Y,et al. Am J Gastroenterology,2008,103:S201-202）通過蛋白質組學等技術首次發現肌動蛋白結合蛋白Transgelin與結直腸癌淋巴轉移密切相關，Transgelin作為單一標誌物預測結直腸癌淋巴結轉移的曲線下面積達86.8%（已獲美國專利）。但目前Transgelin參與結直腸癌轉移的分子機制尚不明確，本課題通過分析Transgelin與核肌動蛋白的相互作用，闡明其核定位機制及參與上皮間質轉化（EMT）的機制，明確Transgelin的上游信號通路及下游作用靶點。通過建立動物移植瘤體內轉移模型，分析Transgelin在結直腸癌轉移中的作用，為防治結直腸癌轉移提供分子基礎，並為進一步治療干預提供新的靶點。
結題摘要
前期採用定量蛋白質組學技術，通過雷射顯微切割（LCM）從冰凍切片上獲得結直腸癌腫瘤細胞，進行蛋白提取及螢光定量標記，通過雙向差異凝膠電泳（2D-DIGE）比較12例淋巴結陽性及12例淋巴結陰性的結直腸癌原發灶中腫瘤細胞的蛋白表達差異，並通過質譜分析獲得蛋白質序列。結果發現在淋巴結陽性的結直腸癌原發灶中肌動蛋白結合蛋白Transgelin較淋巴結陰性者上調大於2倍，Transgelin作為單一標誌物預測淋巴結轉移的曲線下面積（AUC）達86.8%（P=0.002）。進一步通過免疫組織化學染色在結直腸癌組織晶片（共94例）中證實Transgelin的陽性表達在發生淋巴結轉移的結直腸癌原發灶中較淋巴結陰性者更常見（P=0.036）。目前Transgelin參與結直腸癌轉移的分子機制尚不明確，本課題通過體外細胞生物學試驗及建立動物移植瘤體內轉移模型，分析Transgelin在結直腸癌轉移中的作用，明確Transgelin的下游作用靶點，為防治結直腸癌轉移提供分子基礎。本課題圍繞Transgelin的生物學功能，尤其是在結直腸癌轉移中的分子機制展開了一系列全方位的科研探索。初步結果表明，在嚴重聯合免疫缺陷（SCID）小鼠的尾靜脈中注入下調Transgelin表達的結腸癌細胞，發現小鼠肺內轉移瘤形成明顯減少；過表達Transegelin可在體外促進結腸癌細胞的侵襲、集落形成和在軟瓊脂中的克隆形成；通過基因晶片檢出Transgelin下游的一系列與細胞形態、細胞遷移侵襲和細胞內信號活動密切相關的基因；初步探索Transgelin作為轉錄因子/轉錄調控因子的可能性。此外，本課題還探討了TGF-β和HGF對Transgelin表達的影響。
