《FLOT2在結直腸癌侵襲和轉移過程中的作用及其機制研究》是依託南昌大學，由劉東寧擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：FLOT2在結直腸癌侵襲和轉移過程中的作用及其機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：劉東寧
- 依託單位：南昌大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
侵襲和轉移是導致結直腸癌患者治療失敗的主要原因，明確結直腸癌侵襲和轉移的分子機制對結直腸癌的預防、診斷和治療具有重要的理論和實際意義。本課題組前期研究提示FLOT2在結直腸癌細胞和組織中高表達，而且可能與結直腸癌的侵襲和轉移有關。我們擬在前期研究基礎上，擴大臨床樣本數量，明確FLOT2表達狀態與臨床病理學參數、患者預後的關係；利用基因轉染和RNAi技術，構建FLOT2穩定高/低表達細胞株，研究其對結直腸癌細胞惡性生物學行為的影響；建立整體可視化人結直腸癌裸鼠皮下成瘤及轉移瘤動物模型，動態對比觀察腫瘤細胞的成瘤及轉移情況；研究Cdc42-N-WASP-Arp2/3通路在FLOT2調控結直腸癌侵襲和轉移過程中的作用及其機制。本研究旨在闡明結直腸癌中FLOT2表達上調的生物學功能和調控機理，為進一步研究基於FLOT2的診斷、治療和靶向藥物開發奠定理論基礎。
結題摘要
侵襲和轉移是導致結直腸癌患者治療失敗的主要原因，明確結直腸癌侵襲和轉移的分子機制對結直腸癌的預防、診斷和治療具有重要的理論和實際意義。運用RT-PCR、Western blot和IHC技術檢測證實FLOT2在結直腸癌組織中呈高表達。分析FLOT2表達與結直腸癌患者臨床病理特徵及預後的關係，提示FLOT2的表達與結直腸癌的臨床分期、侵襲和轉移相關，FLOT2表達可作為預測結直腸癌患者不良預後的獨立指標。利用基因轉染和RNAi技術，構建FLOT2穩定高/低表達結直腸癌細胞株，採用transwell、劃痕實驗研究FLOT2對結直腸癌細胞惡性生物學行為的影響。劃痕實驗表明FLOT2增強了結直腸癌細胞的轉移能力。Transwell遷移實驗和基質膠侵襲實驗驗證FLOT2增強了結直腸癌細胞的侵襲及遷移能力。建立結直腸癌裸鼠轉移瘤動物模型，體內觀察證實FLOT2促進了結直腸癌細胞的侵襲轉移。顯微鏡下觀察發現，結直腸癌細胞內FLOT2 表達的變化，會引起結直腸癌細胞偽足的變化。利用雷射共聚焦顯微鏡，證實FLOT2 和 Cdc42 蛋白共定位於結直腸癌細胞漿內。運用Western blot技術，證實在結直腸癌細胞中，FLOT2通過FLOT2-Cdc42-N-WASP-Arp2/3 通路來調節偽足的變化，從而發揮生物學功能。本研究初步闡明結直腸癌中FLOT2表達上調的生物學功能和調控機理，為進一步研究基於FLOT2的診斷、治療和靶向藥物開發奠定理論基礎。在本項目研究過程中，培養了3個研究生，1篇SCI已可以在PUBMED中檢索，1篇SCI已接收，1篇SCI已完成撰寫，1篇中文文章已發表。
