《PBX3在結直腸癌生長和轉移中的作用及其分子機制》是依託北京大學，由韓海勃擔任負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：PBX3在結直腸癌生長和轉移中的作用及其分子機制
- 項目負責人：韓海勃
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
我們前期工作發現轉錄因子PBX3作為let-7c的直接下游靶基因參與結直腸癌的生長及轉移，進一步對結直腸癌標本中PBX3表達的初步分析結果顯示，癌組織中PBX3表達量明顯高於癌旁組織，且PBX3基因的表達量與結直腸癌的轉移呈正相關。本課題擬在這些工作的基礎上，深入、系統探索PBX3在結直腸癌轉移、生存期等預後判斷中的套用價值，以及PBX3對結直腸癌細胞生長、存活、成瘤、耐藥、侵襲和轉移等惡性生物學特性的作用及其調控的分子機理，以期為結直腸癌預後預測及治療分子靶標研究提供線索。
結題摘要
結直腸癌是常見的消化道惡性腫瘤，全世界每年新發病例已超過100萬，患者中約有50%會發生肝轉移，其中絕大多數（80%~90%）的肝轉移灶無法獲得根治性切除，是導致病人死亡的最主要原因。近年來，中國結直腸癌的發病率和死亡率均保持上升趨勢。肝轉移灶無法切除患者中位生存期僅6.9個月，5年生存率接近0%。本課題探討PBX3在結直腸癌的侵襲性生長中的作用及其調控機制，分析PBX3在臨床組織標本中表達量與臨床特徵的關係，從而對結直腸癌變和轉移的分子機理有更多的了解，為結直腸癌的預後判斷及治療提供可能的分子標記及靶點。 本研究按照研究計畫完成了PBX3對結直腸癌細胞遷移和侵襲的調控作用，分析了PBX3作用的分子機制。檢測了PBX3在結直腸癌組織標本中的表達水平及與臨床指標之間的關係。通過定量PCR分析結果顯示：PBX3在遷移和侵襲能力較弱的HT-29和SW480細胞中表達水平相對較低，而在侵襲能力較強的LOVO和HCT8中表達水平相對較高。用過表達PBX3的慢病毒顆粒感染HT-29和SW480，並篩選穩定過表達細胞系後， PBX3表達分表升高了7.2和8.9倍，同時細胞的遷移能力分別增加4.7和5.3倍，侵襲能力分別增加5.9和6.6倍。用干擾PBX3表達的慢病毒顆粒感染LOVO和HCT8細胞，篩選穩定過表達細胞系後，PBX3表達水平明顯下降，細胞的遷移和侵襲能力下降4.7和5.3倍，侵襲能力分別增加5.9和6.6倍。通過ChIP sequence 和 RNA sequence 初步分析了PBX3可能直接結合調控的基因。將ChIP sequence 和 RNA sequence 上調的基因做了交集，發現共有643個基因。將這些基因進行KEGG信號通路分析發現MAPK信號通路明顯富集。在PBX3過表達後，p-ERK表達量明顯增強，而PBX3干擾表達後，p-ERK表達量明顯減少。通過MAPK信號通路抑制劑U0126，在過表達PBX3的細胞中抑制MAPK信號通路後，PBX3對結直腸癌侵襲和遷移的促進作用減弱。過定量PCR分析了臨床標本中PBX3表達量，PBX3高表達與患者TNM分期、淋巴結轉移和遠處轉移正相關，PBX3高表達患者生存期較短。 本研究提示PBX3高表達可以作為結直腸癌預後不良的分子標記，PBX3通過MAPK信號通路促進結直腸癌侵襲和遷移。
